闽台洋葱亚细胞定位电话

时间：2020-03-06作者：武汉思特进科技发展有限公司浏览：55

武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的**公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。








采用根癌农介导的方法,以受控于CaMV35S启动子的携带有GFP报告基因的双元植物表达载体pCAMBIA1300-35S-GFP转化洋葱表皮细胞.荧光显微镜下观察结果显示,GFP基因在经浸染和共培养后的洋葱表皮细胞中得到了表达,绿色荧光分布在细胞核和细胞质中,为进一步研究新基因的亚细胞定位和瞬时表达奠定了基础.



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胞质Ca~(2+)是重要的*二信使,通过Ca~(2+)结合蛋白产生磷酸化信号级联,调控下游基因表达。钙依赖而钙调素不依赖的蛋白激酶(calcium-dependent/calmodulin-independentprotein kinases,CDPKs)是一类仅在植物和部分原生生物中存在的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在钙信号转导中具有重要功能。越来越多的证据表明,CDPKs广泛参与植物生长发育、病原防御、非生物环境胁迫等生理反应的信号传递过程。目前在水稻中已发现31个CDPKs基因,但功能明确的只有少数几个基因,本研究的目的就是利用**量表达和RNA干涉(RNA interference,RNAi)技术分析水稻OsCPK2、OsCPK15和OsCPK29的功能,为利用基因工程技术培育水稻新品种提供新的基因资源和理论指导。本研究的主要试验结果如下: 1.通过RT-PCR方法检测了OsCPK2、OsCPK15和OsCPK29三个基因在粳稻品种日本晴分蘖期的根、成熟叶片、穗尖至剑叶叶枕距离分别为0 cm、0-1cm、1-3 cm、3-5 cm、5-8 cm、8-12 cm、12-16 cm、16-20 cm、20-25 cm、25-30 cm、灌浆期稻穗(命名为P1-P12)中的表达谱。试验结果显示:OsCPK2和OsCPK29时期稻穗中表达量较高,在成熟叶片和P12时期稻穗中表达量很低,在分蘖期的根和幼穗中不表达;而OsCPK15在所检测的各个组织和时期中表达量均很高。








洋葱(Allium cepa L.)属百合科葱属,是世界主栽蔬菜之一,也是我国主要的出口蔬菜之一。FT(FLOWERING LOCUS T)基因是开花植物光周期反应过程中调控植物成花的关键基因,也是重要的开花整合因子。实验室在前期工作中已经成功了洋葱的开花素类似基因Ac FT1及Ac LFT,为确定其功能,本试验分别构建了Ac FT1及Ac LFT的正义、反义和RNAi干扰的植物表达载体,通过冻融法导入到根癌农EHA105中,进而通过花序侵染法转入模式植物拟南芥中。通过荧光定量PCR法测定Ac FT1及Ac LFT在拟南芥抽薹前叶片中的相对表达含量,观察转化植株的形态学指标,继而确定Ac FT1及Ac LFT在洋葱成花中的作用,为实现洋葱抽薹开花的基因调控提供参考。试验结果归纳如下:⑴构建了Ac FT1的正义植物表达载体p Z-Ac FT1,反义植物表达载体p R-AcFT1,RNAi植物表达载体p RNAi-Ac FT1;构建了AcLFT的正义植物表达载体p Z-AcLFT,反义植物表达载体p R-Ac LFT,RNAi植物表达载体p RNAi-Ac LFT.;⑵利用冻融法将重组质粒p Z-Ac FT1、p R-Ac FT1、p RNAi-Ac FT1、p Z-Ac LFT、p R-Ac LFT、p RNAi-Ac LFT导入根癌农EHA105中,利用花序侵染法对拟南芥进行转化。



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