儿童毛发中微量元素测定方法学的研究

时间：2020-01-05

Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 是人体生理活动所必需的微量元素，微量元素检测仪对维持肌体正常代谢、促进儿童生长发育、增强*功能等方面起着重要的作用。肌体微量元素的缺乏可引起一系列生化紊乱，生长发育、*过程、细胞分裂、智力发育等均受到干扰，出现很多病理变化及各种疾病。准确测定头发中的微量元素含量均有助于很多疾病的诊断、**、预后估计、疗效观察，以及阐明某些疾病的发病机理，从而为预防这些疾病提供新的方法和措施。本研究通过对原子吸收分光光度法测定健康儿童头发中 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 吸光度的相关实验，旨在分析原子吸收分光光度法测定儿童头发中微量元素的可行性和稳定性。
    1.仪器与试剂
    1.1 仪器
    TAS-990 原子吸收分光光度计 LWP-500 型微量移液器
    1.2 试剂
    Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 标准溶液（1mg/ml）各一份，硝酸（优级纯）；双氧水（优级纯）。
    2.样品
    采用随机抽样的方法抽取自愿接受微量元素检测的 3~7岁健康儿童 90 名，用不锈钢剪从每个研究对象头枕部发根处各剪取不带发囊的头发约 2g，分别装入取样袋内，以待检测。
    3.测定方法
    样品预先经过硝酸 - 双氧水处理后，采用原子吸收分光光度计测定 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 元素的吸光度值。
    3.1 样品的预处理
    将每份发样预先使用洗涤剂浸泡，用蒸馏水冲洗后，再使用去离子水反复冲洗，于 60℃在烘箱中干燥 3 小时。从每份干燥后的发样中各准确称取 0.5 克样品，置于 100ml 的烧杯中，加入硝酸 - 双氧水（HNO3：H2O2=1：1）50ml，小火加热至近干并使之*消化、冷却，用 2%硝酸溶液溶解稀释，转移至 10ml 的容量瓶中，定容待测。
    3.2 标准曲线的绘制
    精密量取 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 标准溶液 1ml 于 10ml 容量瓶中，各加 2%硝酸溶液稀释至 10ml，定容，摇匀，稀释成 100μg/ml 的标准液。再分别精密量取 0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ml 经上述稀释过的 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 标准溶液于 10mL 容量瓶中，并各加2%硝酸溶液稀释至 10ml，定容，摇匀，放置待测。
    4.统计方法
    采用 SPSS 13．0 统计软件进行数据分析，计量资料昼夜微量元素平均含量，比较用 t 检验。
    5.结果
    5.1 标准曲线的线性关系
    取预先配制好的 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 标准溶液，测定各自吸光度与浓度关系，绘制标准曲线，分别如下图。
    5.2 精密度试验
    取预处理后样品 10 份，按照上述方法消化后，在与绘制标准曲线相同的条件下测定每一样品发样中 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 五种元素的的浓度，计算平均值和相对标准偏差，见表 1。
    5.3 加样回收率试验
    取预处理后样品 10 份，其中 5 份分别加入定量的 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 五种微量元素标准液，分别测定其中微量元素含量，数据见表 2。5.4 昼夜差异分析取预处理后样品 5 份，每份样品分别在昼夜测定微量元素的含量，连续测定 3 日，分析昼夜条件对测定结果的影响，数据见表 3。上述数据经统计学软件处理，结果表明被测样本经上述处理后较为稳定，昼夜差异分析无显著性差异（P＞0.05）。
    6.讨论
    目前，国内学者对人头发微量元素的研究较多/blogger/post_read.asp?BlogID=3865745&PostID=47417116但对头发中微量元素的测定方法研究开展不多，尤其是对采用原子吸收分光光度法测定儿童发样中微量元素的研究报道更为少见。有文献报道采用原子吸收法测定微量元素，具有**、简便、准确等优点。本实验研究采用原子吸收分光光度法测定 90 例自愿接受检测的 3~7 岁健康儿童头发中的微量元素，探讨该方法测定头发微量元素的可行性及稳定性。实验研究结果表明，原子吸收分光光度法测定微量元素其吸光度和浓度成正相关，线性依存关系较好，由精密度和回收率试验证明采用该方法进行微量元素测量试验的系统误差和偶然误差发生率较低，试验过程中受外界因素干扰较小，实验室环境以及仪器工作条件稳定，仪器操作、试液配制等正确可行。通过昼夜差异分析可知，采用原子吸收分光光度法进行发样中微量元素测量，实验过程不受时间影响，在不同的时间段本试验均进展顺利。本研究不仅确定了原子吸收分光光度法在不同环境下进行儿童头发中微量元素检测是切实可行的，监测数据准确，测定条件稳定**，而且为今后关于头发微量元素测定的相关课题及其他同类实验研究提供参考。
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