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米中的镉X射线荧光检测器。荧光检测器(Fluorescence Detector,简称FLD)
是高压液相色谱仪常用的一种检测器。用紫外线照射色谱馏分,当试样组分
具有荧光性能时,即可检出。
定量基础
在光致发光中,发射出的辐射总依赖于所吸收的辐射量。由于一个受激发的
分子回到基态时可能以*跃迁的形式产生能量损失,因而发射辐射的光
子数通常都少于吸收辐射的光子数,它以**效率Q来表示。
在固定的实验条件下,**效率是个常数,通常Q小于1。对可用荧光检测的
物质来说,Q值一般在0.1~0.9之间。荧光强度F与吸收光强度成正比。对于
稀溶液,荧光强度与荧光物质溶液浓度、摩尔吸光系数、吸收池厚度、入射
光强度、荧光的**效率及荧光的收集效率等成正相关。在其他因素保持不
变的条件下,物质的荧光强度与该物质溶液浓度成正比,这是荧光检测器的
定量基础。荧光检测器属于溶质型检测器,可直接用于定量分析。
类型
荧光涉及光的吸收和发射两个过程,因此任何荧光化合物,都有两种特征的
光谱:激发光谱(excitation spectrum)和发射光谱(emission spectrum)。
发射光谱
一般所说的荧光光谱,实际上仅指荧光发射光谱。它是在激发单色器波长固
定时,发射单色器进行波长扫描所得的荧光强度随荧光波长(即发射波长,
Em)变化的曲线。荧光光谱可供鉴别荧光物质,并作为荧光测定时选择合适
的测定波长的依据。
激发光谱
荧光属于光致发光,需选择合适的激发光波长(Ex)以利于检测。激发波长可
通过荧光化合物的激发光谱来确定。激发光谱的具体检测办法是通过扫描激
发单色器,使不同波长的入射光激发荧光化合物,产生的荧光通过固定波长
的发射单色器,由光检测元件检测。终得到荧光强度对激发波长的关系曲线
就是激发光谱。在激发光谱曲线的大波长处,处于激发态的分子数目多,即
所吸收的光能量也多,能产生强的荧光。当考虑灵敏度时,测定应选择大激
发波长。
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