考察两种培养及成分能否相互替换,在不同的培养生物条件下得出的结果是不同的,我们要以实际的实验数据来说话。
为使酪酸梭状芽孢杆菌的菌体浓度和芽孢转化率都达到较大,我们对其培养条件进行了研究。结果表明:葡萄糖1.0%、胰蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%、牛肉浸膏0.3%,适量合适的无机盐类,接种前活化菌种,接种量10%,培养36h可获较大菌体浓度和芽孢转化率。
酪酸梭状芽孢杆菌(clostridium butyricum)是一种革兰氏阳性厌氧内生芽胞杆菌。芽孢巨大,生成芽孢后或一端膨大成鼓锤状,或中部膨胀成纺锤状或梭状。其对人畜*;可抑制肠道有害菌,促进有益菌生长;能减少肠内氨、胺含量(这两种物质会损害肝功能);产生多种维生素,如维生素K等;产生多种酶类,提高饲料利用率,促进动物生长。作为微生态制剂功效显著,并能与抗生素配伍使用。
目前广泛应用的非芽孢类活菌制剂(如乳酸菌)普遍存在保存期短,活性不稳定的缺点,给实际应用带来很多困难,这个问题在动物用微生态制剂上尤为明显。由于动物用微生态制剂的补充是通过饲料添加途径,而在此过程中不可避免的要经历某些高温或特殊pH的生产、运输及饲喂环节。而非芽孢类活菌制剂在这种情况下,其活性会大大降低,进而严重影响使用效果。因此本试验的目的就是要在获得酪酸菌较大菌体得率的同时提高芽孢转化率,以提高其对各种恶劣的环境因素的抗性,延长制剂保存期,稳定活性。
为了获得较高的酪酸菌菌体得率和芽孢转化率,我们对培养基成分,接种量,培养时间,菌种优化方法进行了研究,并对生长过程进行48h观测,得出了生长过程中菌体浓度、 pH、芽孢形成率等因素的变化规律和相互关系。并在100L发酵罐上进行了扩大培养,效果良好。
1 材料与方法
1.1 菌种
JSMCB,江苏省微生物研究所保藏。
1.2 试剂
葡萄糖、蔗糖、乳糖、可溶性淀粉、胰蛋白胨、酵母膏、牛肉浸膏、NaCl、(NH4)2SO4、K2HPO4、MgSO4、MnSO4、NaHCO3、CaCO3,孔雀绿染液,蕃红染液。以上试剂均为国产分析纯试剂。
1.3 基础培养基
葡萄糖0.5%、牛肉蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%、NaCl 0.2%、K2HPO4 0.4%、CaCO3 0.1%。
1.4 器材
TH-GB-403型**净工作台,江苏省无锡县空气净化设备厂;PYX-DHS-40X恒温培养箱,上海市跃进医疗器械一厂;123MB-1型光学显微镜,Nikon;XB-K-25型血球计数板,上海医乐医用光学仪器厂。
1.5 培养方法
液体深层静置培养:250ml三角瓶装液量200ml,于37℃恒温培养箱中静置培养。
1.6 检测方法
菌数测定用血球计数法、菌体形态用芽孢染色法[4]染色后于显微镜下观察。
2 结果与分析
2.1 培养基成分试验
2.1.1 碳、氮源配比试验
调节碳、氮源种类和添加量,为菌体生长提供足够的营养,从而使菌体浓度达到较大。
2.1.1.1 不同碳源对菌体浓度的影响
分别以1.0%葡萄糖,3.0%蔗糖,3.0%乳糖,3.0%可溶性淀粉为碳源,代替基础培养基中0.5%的葡萄糖,基础培养基中其它成分不变,对酪酸菌进行液体深层静置培养。培养24h,结果见表1。试验结果表明以葡萄糖为碳源培养效果较好。
词条
词条说明
蛋白胨,英文名称:peptone,是**化合物。蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂,具有肉香的特殊气息。蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。在胃内蛋白质的初步消化产物之一就是蛋白胨。蛋白胨富含**氮化合物,也含有一些维生素和糖类。它可以作为微生物培养基的主要原料,在抗生素、医药工业、发酵工业、生化制品及微生物学科研等
蛋白胨,英文名称:peptone,是**化合物。蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂,具有肉香的特殊气息。蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。在胃内蛋白质的初步消化产物之一就是蛋白胨。蛋白胨富含**氮化合物,也含有一些维生素和糖类。它可以作为微生物培养基的主要原料,在抗生素、医药工业、发酵工业、生化制品及微生物学科研等领域中的用量均很大,可以用来**消化道
胰蛋白胨,又称胰酪蛋白胨(Casein Tryptone) 、胰酶消化酪蛋白胨(Pancreatic digest of casein),是一种优质蛋白胨,浓缩干燥而成的浅黄色粉末。具有色浅、易溶、透明、无沉淀等良好的物理性状。国产的胰蛋白胨一般是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化而得到,与进口的成分和工艺不同。进口的胰蛋白胨以酪蛋白为基础进行消化,实为胰酪蛋白胨;而国产的是以肉、
蛋白胨的分类方法有很多种,不同方法分类可以分出好多种产品类别,常规的分类方法有按照原材料笼统分类,按照原材料细化分类以及按照使用用途等级分类以及用途的细化分类等等,说的可能比较绕口,细说一下就清楚了。按照原材料笼统分类:动物性蛋白胨、植物性蛋白胨、生物性蛋白胨等等三大类。按照原料细化分类就比较精细了:其中可分为大豆蛋白胨、牛肉蛋白胨、牛骨蛋白胨、鱼蛋白胨、猪皮蛋白胨等等,任何一种原料都可以成为一种
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