考察两种培养及成分能否相互替换,在不同的培养生物条件下得出的结果是不同的,我们要以实际的实验数据来说话。
为使酪酸梭状芽孢杆菌的菌体浓度和芽孢转化率都达到较大,我们对其培养条件进行了研究。结果表明:葡萄糖1.0%、胰蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%、牛肉浸膏0.3%,适量合适的无机盐类,接种前活化菌种,接种量10%,培养36h可获较大菌体浓度和芽孢转化率。
酪酸梭状芽孢杆菌(clostridium butyricum)是一种革兰氏阳性厌氧内生芽胞杆菌。芽孢巨大,生成芽孢后或一端膨大成鼓锤状,或中部膨胀成纺锤状或梭状。其对人畜*;可抑制肠道有害菌,促进有益菌生长;能减少肠内氨、胺含量(这两种物质会损害肝功能);产生多种维生素,如维生素K等;产生多种酶类,提高饲料利用率,促进动物生长。作为微生态制剂功效显著,并能与抗生素配伍使用。
目前广泛应用的非芽孢类活菌制剂(如乳酸菌)普遍存在保存期短,活性不稳定的缺点,给实际应用带来很多困难,这个问题在动物用微生态制剂上尤为明显。由于动物用微生态制剂的补充是通过饲料添加途径,而在此过程中不可避免的要经历某些高温或特殊pH的生产、运输及饲喂环节。而非芽孢类活菌制剂在这种情况下,其活性会大大降低,进而严重影响使用效果。因此本试验的目的就是要在获得酪酸菌较大菌体得率的同时提高芽孢转化率,以提高其对各种恶劣的环境因素的抗性,延长制剂保存期,稳定活性。
为了获得较高的酪酸菌菌体得率和芽孢转化率,我们对培养基成分,接种量,培养时间,菌种优化方法进行了研究,并对生长过程进行48h观测,得出了生长过程中菌体浓度、 pH、芽孢形成率等因素的变化规律和相互关系。并在100L发酵罐上进行了扩大培养,效果良好。
1 材料与方法
1.1 菌种
JSMCB,江苏省微生物研究所保藏。
1.2 试剂
葡萄糖、蔗糖、乳糖、可溶性淀粉、胰蛋白胨、酵母膏、牛肉浸膏、NaCl、(NH4)2SO4、K2HPO4、MgSO4、MnSO4、NaHCO3、CaCO3,孔雀绿染液,蕃红染液。以上试剂均为国产分析纯试剂。
1.3 基础培养基
葡萄糖0.5%、牛肉蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%、NaCl 0.2%、K2HPO4 0.4%、CaCO3 0.1%。
1.4 器材
TH-GB-403型**净工作台,江苏省无锡县空气净化设备厂;PYX-DHS-40X恒温培养箱,上海市跃进医疗器械一厂;123MB-1型光学显微镜,Nikon;XB-K-25型血球计数板,上海医乐医用光学仪器厂。
1.5 培养方法
液体深层静置培养:250ml三角瓶装液量200ml,于37℃恒温培养箱中静置培养。
1.6 检测方法
菌数测定用血球计数法、菌体形态用芽孢染色法[4]染色后于显微镜下观察。
2 结果与分析
2.1 培养基成分试验
2.1.1 碳、氮源配比试验
调节碳、氮源种类和添加量,为菌体生长提供足够的营养,从而使菌体浓度达到较大。
2.1.1.1 不同碳源对菌体浓度的影响
分别以1.0%葡萄糖,3.0%蔗糖,3.0%乳糖,3.0%可溶性淀粉为碳源,代替基础培养基中0.5%的葡萄糖,基础培养基中其它成分不变,对酪酸菌进行液体深层静置培养。培养24h,结果见表1。试验结果表明以葡萄糖为碳源培养效果较好。
词条
词条说明
考察两种培养及成分能否相互替换,在不同的培养生物条件下得出的结果是不同的,我们要以实际的实验数据来说话。为使酪酸梭状芽孢杆菌的菌体浓度和芽孢转化率都达到较大,我们对其培养条件进行了研究。结果表明:葡萄糖1.0%、胰蛋白胨1.0%、酵母膏0.5%、牛肉浸膏0.3%,适量合适的无机盐类,接种前活化菌种,接种量10%,培养36h可获较大菌体浓度和芽孢转化率。酪酸梭状芽孢杆菌(clostridium bu
蛋白胨根据其纯度不同,杂质含量多少可以分出很多等级,我国将各种化学试剂分成多个等级,不同等级有不同的标准,可用于不同的使用范围。国标试剂:该类试剂为我国国家标准所规定,适用于检验、鉴定、检测。基准试剂(PT,绿标签):作为基准物质,标定标准溶液。优级纯(GR,Guaranteed Reagent 绿标签)(一级品): 主成分含量很高、纯度很高,适用于精确分析和研究工作,有的可作为基准物质。分析纯(
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