磁珠分选纯化试剂盒推广应用

时间：2022-07-18

基于 SPRI(Solid Phase Reversible Immobilization ) 技术，在磁珠法反应体系中，核酸分子（DNA & RNA）会由线性压缩成球状， DNA 在一定浓度的 PEG 存在条件下，NaCl 或 MgCl2 促进条件下，DNA 分子构象会发生急剧变化，会暴露出磷酸骨架上大量的带负电荷的磷酸基团，与表面带负电荷的羧基-COOH 磁珠结合。目前认为这种负负电荷间的作用是由于带正电荷的盐离子的作用（如 Na+）。带负电磷酸基团借由解离的盐离子（如 Na+）与羧基形成「阴离子-阳离子-阴离子」的盐桥结构，使 DNA 被特异性吸附到羧基磁珠表面。而当反应缓冲液被弃除后，加入水性分子，会快速充分水化核酸分子，解除三者之间的离子相互作用，使吸附到磁珠上的核酸分子被纯化出来。利用磁珠的磁性，可通过外加磁场进行收集。

受益于高通量测序技术的发展，磁珠也凭借其高通量，适用于自动化的特点备受推崇，广泛用于 NGS 文库构建中的 DNA 提取纯化及双轮分选（片筛）。

DNA 提取纯化的目的在于去除不想要的片段、回收需要的片段。由于磁珠**吸附大片段，因而可通过一定比例的磁珠吸附特定大小以上的片段，丢弃上清（去除非目标片段）后将磁珠吸附的 DNA 洗脱回收。

DNA 双轮分选（片筛）目的在于从片段中选择特定区域的 DNA 片段大小。由于磁珠**吸附大片段，因而需通过两轮磁珠操作进行分选。

兔牙生物科技研发的 BunnyMagTM 磁珠分选纯化试剂盒中的磁珠，与市面上大部分的磁珠类似，

磁珠结构（分为 3 层）：

• 较内层的核心是 Polystyrene，PS

• *二层包裹磁性物质——四氧化三铁（Fe3O4）

• 较外层表面是羧基（-COOH）修饰的高分子材料

磁珠体系主要包括磁珠、聚乙二醇（PEG）、盐离子（NaCl）

兔牙科技 BunnyMagTM 磁珠的优势：

（1）样本需求量低：微量的材料即可提到高浓度的核酸；

（2）操作简单快速：整个操作流程基本分为五步（裂解、结合、洗涤、干燥、洗脱），全程*离心操作，大多可在 30～60 分钟内完成；

（3）质量稳定可靠：游离的磁珠与核酸的结合量更大，特异性的结合使得核酸纯度更高，且可通过控制磁珠表面基团来调节核酸回收量；

（4）全自动化操作：采用核酸提取仪可实现自动化、高通量操作，可实现几十甚至几百个样品的提取；

（5）安全无毒无害：试剂不含酚等有毒化学试剂，完全符合现代化环保理念。

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