饲料粗脂肪的测定方法

时间：2024-11-21作者：杭州川一实验仪器有限公司浏览：185

【教学目标】
1.学会各种饲料样本的粗脂肪的方法。
2.学会仪器的使用
【教学重点】样本的测定方法。
【教学方法】操作指导
【课时分配】6学时
【原理】索氏脂肪提取器中用乙mi提取试样，称提取物的重量，除脂肪外还有**酸，磷脂、脂溶性Vit，叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙mi提取物。
【分析步骤】
1）仲裁法使用索氏脂肪提取器测定。
索氏提取器应干燥无水。抽提瓶(内有沸石数粒)在105℃±2℃烘箱中烘干60min，干燥器中冷却30min，称重。再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于0.0008g为恒重。
称取试样1～5g(准确至0.0002g)，于滤纸筒中，或用滤纸包好，放入105℃±2℃烘箱中，烘干120min(或称测水分后的干试样，折算成风干样重)，滤纸筒应**提取器虹吸管的高度，滤纸包长度应以可全部浸泡于乙mi中为准。将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙mi60～100mL，在60～75℃的水浴(用蒸馏水)上加热，使乙mi回流，控制乙mi回流次数为每小时约10次，共回流约50次(含油高的试样约70次)或检查抽提管流出的乙mi挥发后不留下油迹为抽提终点。
取出试样，仍用原提取器回收乙mi直至抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去残余乙mi。擦净瓶外壁。将抽提瓶放入105℃±2℃烘箱中烘干120min，干燥器中冷却30min称重，再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于O.OOlg为恒重。
2）结果计算


式中：m ——风干试样重量，g。
m1 ——已恒重的抽提瓶重量，g。
m2——己恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g。
3）推荐法
⑴鲁氏残留法
①操作步骤
a.将脱脂滤纸裁成10×10cm2大小，叠成一边不封口的纸包，用铅笔编号，按顺序排列于培养皿上，置于105℃土2℃烘箱中烘2h，取出放于干燥器中冷却至室温，分别放入同一称量瓶中称重(m0，g)。
b.将2～5g风干样品(通过40目筛)用小药匙小心装入已经称重的纸包中，封上包口。
按顺序排列于培养皿中。置于105℃±2℃烘箱中烘3h，取出放入干燥器中冷却至室温，分别放入原称量瓶中，称至恒重(m1，g)。将样品包放入抽提管中，倒入无水乙mi，使之刚**过样品包高度，浸泡过夜。然后将浸泡过样品的无水乙mi放入抽提瓶中，再重新向抽提管中倒入无水乙mi，使之浸没样品包。连接装置，接通冷凝水，在70～80℃水浴锅中回流6～8h，回流速度以每分钟20mL左右为宜。抽提完毕，取出样品包，在通风处挥干乙mi．剩余乙mi可进行回收。
c.将样品包仍按原序号排列在培养皿中，置于105℃±2℃烘箱中烘2h，取出放入干燥器中冷却至室温，再将样品包放原称量瓶中，称至恒重(m2，g)。
②结果计算
粗脂肪＝ m1－m2×**
m1－m0
式中，m0——滤纸＋称量瓶重（g）；
m1——提取前样品包＋称量瓶重（g）；
m2——提取后样品包＋称量瓶重（g）。
上述两种方法都是以乙mi为溶剂的提取方法，其优点是具有较好的准确度和精密度，尤其是测定粗脂肪含量在5%以下的样品，用此法比较可靠。缺点是费工费时，反复提取需8～16h；另外乙mi不能将样品中的全部脂肪提尽。这是因为部分脂肪常与蛋白质或碳水化合物等非脂肪成分结合。成为结合态脂类，如脂蛋白、糖脂、磷酯等，同时样品也是烘干的，因乙mi难以渗入含水样品的组织内部。在烘干样品时，又应考虑到脂肪在高温下易被空气氧化等情况。
⑵脂肪测定仪
①操作步骤
a.打开恒温加热装置开关，控制工作温度为75℃。
b.用万分之一分析天平称2g左右的样品(准确至0.0002g) (m1)，放入滤纸筒内烘干。
c.用套筒夹将6个滤纸套筒装入浸提冷凝管内，当确信套筒已被磁铁吸牢后取下套简夹。
d.用分析天平称浸提杯重量(m2)，然后加入约50mL无水乙mi，用杯托将6个浸提杯放在加热板上，再将冷凝管提升机构搬下，使浸提怀与冷凝管连接好。
e.事先接通浸提冷凝管的冷却水，将滤纸筒置于“沸腾”位置。冷凝管应有良好的冷凝作用；
f.无水乙mi沸腾15min或30min(依样品含油量而异)后，将滤纸筒提升到“冲洗”位置，冲洗30min或45min。
g.冲洗结束后，关闭冷凝管旋塞阀，回收乙mi。
h.松开冷凝管提升机构，取下浸提杯，并放入烘箱烘干。
i.在干燥器中冷却浸提杯，然后用分析天平称重(m3)。
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