应用固相萃取技术时的注意事项

时间：2024-11-15

1.尽量慢。
我们在用固相萃取仪时，面临的一个问题就是:液体应该以什么速率过柱流出，我的经验是，要想效果好，就要慢，尽量慢。.
对于固相萃取仪柱中的填料，我们如果局部放大地看，能够看到其实它们是有很多的空际，液体流通的渠道很多，如果流得快，相当比例的待测组分还来不及与填料充分作用就地从通道流失;所以要慢，给它们一个充分作用的机会。
如何慢呢?一个窍门就是不要用配合抽气机使用的所谓固相萃取仪器，而采用再普通不过的重力法。利用重力的作用使液体向下流出。在实验速度上，重力法远不如吸力法，但是在实验效果方面，重力法远比吸力法优胜，用吸力法只能得到谱带吸附，用重力法却能得到柱头吸附，在速度和效果两者的平衡中，我们还是倾向于**保证好的效果。
举例来说，一个3ml500mg的C18小柱，如果加甲醇活化，其甲醇全部流至筛板时间约为20分钟，而在过样品液时，25ml 的液体*多2小时可以流完，而且用重力法如果得当，工作速率不比吸力法差很多。因为我们可以充分利用空闲时间，用吸力法*须有人在旁边守候，而重力法由于不需要用电，可以充分利用午休和晚上时间过柱，液体量大时接个堆叠接头和延长管即可，安排好实验步骤，工作效率一样很高。另外，重力法不需要抽气机和固相萃取仪器。
2.尽量少。
在固相萃取仪条件选择上，有人为了提高提取效率，尽量多加液体，或选择填料量大的小柱，我觉得大可不*如此。尤其在用重力法时，由于效率高，很多情况下是柱头吸附，并不是所有的填料都在起作用，填料多了不仅液体流出速度会更慢，而且在洗脱时的扩散会很明显。
n. com因此建议，够用就行，在能保证效率时，填料尽量少，加液也不宜多。
3.实验条件不宜过分细化。
固相萃取仪从原理上是色谱分离，但是在操作时*好只把它作为吸附萃取剂使用，由于填料性质、松紧常有差异，因此在实际实验中不*因为追求效果的*佳化而设计出很复杂的洗脱程序。
在建立条件中，我们应该尽量多利用现成的资料，尽快地建立起体系，同时要对操作过于复杂的步骤保持警惕性，在实验效果，实验速率和易操作性三者中取得平衡点。
4.只用一次
固相萃取仪柱*好只用一.次。因为从严格的意义上来说，很多物质的吸附是不可逆的，一次吸附，无法洗脱，影响着下一次吸附，虽然有人反复的实验，但是总体来说为了节省经费而大大增加了实验的不可靠性和不确定性，是很不合算的行为。

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