凯氏定氮仪测定粗蛋白的步骤

时间：2024-12-24

1 原理
在样品消化液中加入适量铝片和固氢氧化纳，从而利用强碱与铝反应产生氢气和大量热，使样品消化液中的按盐以氨的形式排出：
NH3随着HZ进入硼酸吸收液被吸收，后通过盐酸滴定硼酸吸收液所消耗的体积数，即可确定样品中粗蛋白含量。
2 材料与方法
2.1材料
2.1.1试剂分析纯固体氢氧化钠。铝片：用输液瓶铝盖，每个剪成4小片，并预先用5%NaOH浸泡数分钟，然后用清水洗至中性，凉干；也可用铝电线打压成片状，经洗涤处理。其它试剂同GB.
2.1.2样品面粉、不米面、小米、大米，
2.2方法
2.2.1样品消化同GB方法。
2.2.2浏定取5ml定容混匀的消化液于25oml三角瓶中，加新蒸馏水Zoml,加29铝片，后加59固体NaOH,立即盖上带有弯管的橡皮塞，并将弯管末端插入盛有30ml%硼酸液内km深处（硼酸液预先加2滴混合指示剂），反应10分钟。取下吸收瓶，用olmol/L盐酸标准液滴定至浅紫色即达终点，同时做空白试验，然后根据滴定消耗盐酸量，按GB计算公式计算样品粗蛋白干基含量。
3 结论与讨论
3.1实验结果
3.1.1对比实验在与原标准方法对比试验中，二者结果无显著差异（P>0.05）月。改进法测定结果略高八方么。实验见表1
3.1.2准确度与精度实验选用分析纯钱作标准物进行含氮量试验，其结果见表2.由表2可见，改进法测定按含氮量的标准差为0.03,变异系数为0.2%,相对误差0.52%.
3.2方法讨论
3.2.1本法特点所需凯氏定氮仪设备简单，试剂亦较为普通，操作更为简便、快速，*加热设备，既节约费用，又便于基层推广。
3.2.2实验条件
选择本法中固体NaOH和铝片的使用量直接影响着样品消化液中氨的蒸馏与吸收程度，为此，我们用已知蛋白质含量样品，并采取其它实验条件不变，而仅改变某一条件量进行了铝片、固体NaOH加入量和蒸馏反应时间的试验，初步结果我们认为：铝片29,固NaOH5g,反应蒸馏时间10分钟，即可达到较满意的测定效果。
3.2.3实验注意事项
3.2.3.1实验中有大量HZ放出，所以需注意避免明火。
3.2.3.2样品消化液要随稀释随蒸馏测足，不能放置太久，否nylJ影响测定结果。
3.2.3.3加入铝和氢氧化钠时。其顺序不可颠倒，且铝片不要剪得过碎，否则，产生H:速度过快，会影响硼酸对氨的吸收效果。
3.23.4蒸灿元毕后样品残液碱度较大，需注意防腐和；另外，导管末端需用少量蒸馏水冲洗二次，洗液入硼酸吸收液。
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