范式洗涤剂法--木质纤维素测定标准方法
原理:
采用范式(Van Soest )的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)原理:
植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理,不溶解的残渣为中性洗涤纤维,主要为细胞壁成分,其中包括板纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。植物性饲料经酸性洗涤剂处理,剩余的残渣为酸性洗涤纤维,其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。酸性洗涤纤维经72%处理后的残渣为木质素和硅酸盐,从酸性洗涤纤维值中减去72%处理后的残渣为饲料的纤维素含量。将72%处理后的残渣灰化,在灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素(SDL)的含量。
溶剂配制:
中性洗涤剂(3%十二烷基):准备称取18.6g四乙酸二钠(EDTA,C10H14O8Na2.2H2O,分析纯)和6.8g硼酸钠(Na2B4O7.10H2O,分析纯)放入烧杯中,加入少量蒸馏水,加入溶解后,再加入30g十二烷基(C12H25NaO4S,分析纯)和10ml(C4H10O2,分析纯);再称取4.56g污水磷酸氢二钠(Na2HPO4,分析纯)置于另一烧杯中,加入少量蒸馏水微微加热溶解后,倒入**个烧杯中,在容量瓶中稀释至1000ml,其中PH值约为6.9-7.1(PH一般勿需调整);1N:量取约27.87ml浓(分析纯,比重1.84,98%),徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中,冷却后注入1000ml容量瓶定容,标定;酸性洗涤剂(2%十六烷**基化铵):称取20g十六烷**基化铵(CTAB,分析纯)溶于1000ml1N,必要时过滤;
操作步骤:
准确称取1.0g样品(通过40目筛)置于直筒烧杯中,加入100ml酸性洗涤剂和数滴及0.5g无水亚。将烧杯套上冷凝装置于电炉上,在5-10min内煮沸,并持续保持微沸60min。趁热用已知重量的玻璃坩埚抽滤,并用沸水反复冲洗玻璃坩埚及残渣至滤液呈中性为止。用少量冲洗残渣至抽下的液呈无色为主,并抽净,将玻璃坩埚置于105度烘箱中烘2h后,在干燥器中冷却30min称重,直称到恒重。
酸性洗涤木质素和酸不溶灰分(AIA)测定
将酸性洗涤纤维加入72%,在20度消化3h后过滤,并冲洗至中性。消化过程中溶解部分为纤维素,不溶解的残渣为酸性洗涤木质素和酸不溶灰分,将残渣烘干并灼烧灰化后即可得出酸洗洗涤木质素和酸不溶灰分的含量。
实验步骤
1、 中性洗涤纤维测定
准确称取1.0g样品W(通过40目筛)置于直筒烧杯中,加入100ml中性洗涤剂和数滴及0.5g无水亚。
将烧杯套上冷凝装置于电炉上,在5-10min内煮沸,并持续保持微沸60min。(注意加水保持刻度在100ml)
煮沸完毕后,取下直筒烧杯,趁热用已知重量的玻璃坩埚W2进行抽滤,将烧杯中的残渣全部移入,并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣,直洗至滤液呈中性为止。
用20ml内酮冲洗二次,抽滤。
将玻璃坩埚置105度烘箱中烘2h后,在干燥器中冷却30min称重,直称至恒重W1。
中性洗涤纤维含量的计算:NDF(%)=(W1-W2)/W*100
2、 酸性洗涤纤维测定
准确称取1.0g样品G(通过40目筛)置于直筒烧杯中,加入100ml酸性洗涤剂和数滴及0.5g无水亚。
将烧杯套上冷凝装置于电炉上,在5-10min内煮沸,并持续保持微沸60min。趁热用已知重量的玻璃坩埚G2抽滤,并用沸水反复冲洗玻璃坩埚及残渣至滤液呈中性为止。
用少量冲洗残渣至抽下的液呈无色为止,并拍净。
将玻璃坩埚置于105度烘箱中烘2H后,在干燥器中冷却30min称重,直称至恒重G1。
酸性洗涤纤维含量的计算:ADF(%)=(G1-G2)/G*100
半纤维素含量的计算:ADS(%)=NDF(%)-ADF(%)
3、 酸性洗涤木质素和酸不溶灰分(AIA)测定
把酸性洗涤纤维置于50ml烧杯中,加入5ml72%,20度水解3h,然后加水45ml,室温过夜,次日用已称恒重的3号砂芯漏斗H2过滤,水洗残渣使滤液至PH6.5,于60度烘干,称重H1。把剩余残渣在马弗炉中550度经2.5H灰化,测得灰分重量H3。
纤维素含量的计算:纤维素= ADF(%)-经72%处理后的残渣(%) (H1-H2)/G*100
酸性洗涤木质素(ADL)含量的计算:ADF(%)=残渣(%)-灰分(硅酸盐,%)=(H1-H2-H3)/G*100
结果计算:
中性洗涤纤维含量的计算:NDF(%)=(W1-W2)/W*100
式中:
W1-----玻璃坩埚和NDF重(g)
W2-----玻璃坩埚重(g)
W---试样重(g)
酸性洗涤纤维含量的计算:ADF(%)=(G1-G2)/G*100
式中:
G1----玻璃坩埚和A
DF重(g)
G2-----玻璃坩埚重(g)
G---试样重(g)
半纤维素含量的计算:半纤维素%=NDF(%)-ADF(%)
纤维素含量的计算:纤维素= ADF(%)-经72%处理后的残渣(%)
酸性洗涤木质素(ADL)含量的计算:ADF(%)=残渣(%)-灰分(硅酸盐,%)
词条
词条说明
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