应用固相萃取仪技术时的注意事项

时间：2024-11-22

应用固相萃取仪技术时的注意事项

1.尽量慢。
我们在用固相萃取仪时，面临的一个问题就是:液体应该以什么速率过柱流出，我的经验是，要想效果好，就要慢，尽量慢。.
对于固相萃取仪柱中的填料，我们如果局部放大地看，能够看到其实它们是有很多的空际，液体流通的渠道很多，如果流得快，相当比例的待测组分还来不及与填料充分作用就地从通道流失;所以要慢，给它们一个充分作用的机会。
如何慢呢?一个窍门就是不要用配合抽气机使用的所谓固相萃取仪器，而采用再普通不过的重力法。利用重力的作用使液体向下流出。在实验速度上，重力法远不如吸力法，但是在实验效果方面，重力法远比吸力法优胜，用吸力法只能得到谱带吸附，用重力法却能得到柱头吸附，在速度和效果两者的平衡中，我们还是倾向于保证好的效果。
举例来说，一个3ml500mg的C18小柱，如果加活化，其全部流至筛板时间约为20分钟，而在过样品液时，25ml 的液体*多2小时可以流完，而且用重力法如果得当，工作速率不比吸力法差很多。因为我们可以充分利用空闲时间，用吸力法*须有人在旁边守候，而重力法由于不需要用电，可以充分利用午休和晚上时间过柱，液体量大时接个堆叠接头和延长管即可，安排好实验步骤，工作效率一样很高。另外，重力法不需要抽气机和固相萃取仪器。
2.尽量少。
在固相萃取仪条件选择上，有人为了提高提取效率，尽量多加液体，或选择填料量大的小柱，我觉得大可不*如此。尤其在用重力法时，由于效，很多情况下是柱头吸附，并不是所有的填料都在起作用，填料多了不仅液体流出速度会慢，而且在洗脱时的扩散会很明显。
n. com因此建议，够用就行，在能保证效率时，填料尽量少，加液也不宜多。
3.实验条件不宜过分细化。
固相萃取仪从原理上是色谱分离，但是在操作时*好只把它作为吸附萃取剂使用，由于填料性质、松紧常有差异，因此在实际实验中不*因为追求效果的*佳化而设计出很复杂的洗脱程序。
在建立条件中，我们应该尽量多利用现成的资料，尽快地建立起体系，同时要对操作过于复杂的步骤保持警惕性，在实验效果，实验速率和易操作性三者中平衡点。
4.只用一次
固相萃取仪柱*好只用一.次。因为从严格的意义上来说，很多物质的吸附是不可逆的，一次吸附，无法洗脱，影响着下一次吸附，虽然有人做过重用的实验，但是总体来说为了节省- -点经费而大大增加了结果的不性和不确定性，是很不合算的行为。

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