粮食饲料行业呕吐毒素检测荧光定量

时间：2022-04-19

呕吐毒素简介

呕吐毒素主要成分为DON（deoxynivalenol），，化学名为3α, 7α, 15一三羟基草镰孢菌-9-烯-8-酮，是一种单端孢霉烯的族化合物。而单端孢霉烯族毒素一共有150多种，呕吐毒素（DON）是单端孢霉烯族毒素中较重要的一种毒素。呕吐毒素主要是来自于镰刀菌属，包括为禾谷镰刀菌和黄色镰刀菌。呕吐毒素DON对于粮食谷物类的污染状况与产生毒素的菌株、温度、湿度、通风、日照等因素有关。主要污染物有小麦、大麦、燕麦、玉米等谷类作物；面包、饼干、麦制点心等粮食制品；动物的奶、蛋中等。小麦赤霉病主要分布在潮湿温带地区，我国大部分地区又处于这一地带，所以造成呕吐毒素DON污染较严重，而在多雨年份地区污染状况则更为严重，这给饲料企业以及养殖业主带来了很大的损失，人们食用含有呕吐毒素的食物会危害到人体健康。

呕吐毒素检测原理

本试剂采用**点荧光竞争法定量检测样本中呕吐毒素的浓度。应用**点*层析技术，以条状纤维层析材料为固相，通过毛细作用使样品溶液到达*位置反应。检测时，样品中的呕吐毒素与**点标记的特异性抗体结合，抑制抗体与检测线（T 线）上的DON-BSA偶联物之间的结合，导致T线荧光值变化，通过T线荧光值信号的高低来计算呕吐毒素的含量。

呕吐毒素检测范围

玉米、玉米副产品、小麦、麸皮、菜粕、棉粕、花生粕、部分成品饲料

呕吐毒素技术指标

检测范围：100-5000 μg/kg ( ppb ),

较低检出限： 100 μg/kg ( ppb )

呕吐毒素检测产品组成

需自备仪器耗材：电子天平、离心机、粉碎机、

50ml离心管或锥形瓶、振荡器、10~100μL移液器、 50-1000 μL移液器及吸头、龙科新域多通量荧光检测平台。（注：配套仪器及相关耗材可来电咨询。）

名称	数量	名称	数量
微孔条	8T×5	试剂桶	5个
样品稀释液	20mL /瓶×1瓶	检测试剂条	40条
说明书		1 份

龙科新域呕吐毒素检测试剂盒使用前注意事项

1.请在环境温度22~27℃下操作。

2.试剂条和微孔较易受潮，打开小包装后应立即使用。

3.请使用配套的卡托装条检测。

4.样品提取液为易挥发液体，不用时请拧紧瓶盖。

5.请勿使用自来水、纯化水作为阴性对照，可以用稀释液作为阴性对照。

6.*层析试纸条与ELISA法试剂盒为属于快检试剂，检测结果仅供初步筛选使用，不做较终判定，如需准确定量，请使用标准判定方法进一步确认。

呕吐毒素荧光定量检测卡操作流程

步骤	具体操作说明
校准	我们提供给您免费校准品用于试验校准，操作方法可直接跳过提取操作步骤从稀释开始进行。请在实验前先将设备与配套试剂进行校准后在进行试验，这样您每次试验都会得到更满意的结果，建议您至少每个试剂盒进行一次校准,如有异常请联系厂家。
准备	1 提前至少30分钟打开多功能孵育器预热。 2 取代表性样品≥1kg进行粉碎过20目筛，混合均匀。 3 配制50%乙醇（提取液）：1∶1（v/v）乙醇/水。 4 将微孔条放至孵育器载架微孔中，吸取100ul样本稀释液加到微孔中，插入相对应项目的试纸条放置载架上备用。提示：粉碎后的样本不能出现颗粒状（可过20目筛），如存在请延长粉碎时间或过筛。常规检测每份样本需要40ml提取液。孵育器需要提前预热，预热不充分会导致检测结果偏高的可能。请使用双蒸水或纯化水配液。
提取	称取5.00g样本加入40ml 提取液，涡旋震荡3分钟，之后静置3分钟以上（静置是为了更好的吸取提取后上清液，如果样本量不多可采取离心或过滤以加速此过程）。提示：提取时可以将样本放在50ml离心管中震荡也可使用锥形瓶，如瓶子较大可多称取样本，再按照料液比1:8比例进行提取。提取液为50%乙醇。样品提取液及样品稀释液均为通用试剂，可与龙科品牌荧光定量检测产品共用。震荡充分很重要，可以使用摇床，要保证震荡充分，摇床或手摇提取时间大于10分钟。
稀释	将400μL样品稀释液加入到离心管中，再从静置后的样本提取液中吸取100μL上清液加到离心管中充分震荡后，7000rpm离心1分钟（或4000转速离心5分钟）。提示：如果检测结果**出检测范围,请用样本提取液进行稀释,建议稀释2倍,稀释倍数越大,检测误差越大。
上样	吸取离心后上清液100ul加入到微孔中吹打混匀10次以上。
孵育	旋转孵育器闭合钮，检测卡落下，准确计时 7min后将检测卡取出插入读数仪1min内判读结果。注意事项：孵育器需要提前至少30min预热。孵育器自带关盖自动计时功能，期间请不要随意打开孵育器上盖。
结果	读取IC卡：将IC卡放置于读数仪右上角读卡区，点击扫描按钮即可录入数据（该步骤提前操作，每盒扫描一次即可）。将三联检测卡推入卡槽中，选择对应的卡托通道“检测”下拉菜单中选择“DON”按钮点击“开始检测”按钮，读数仪会自动进卡读值。（龙科新域读数仪具有数据一键导入U盘，查看历史数据、打印数据、质控对照等功能具体使用可联系我们）

呕吐毒素快速检测试剂盒保藏方法

4-28

℃ 避光干燥保存

呕吐毒素相关标准
样本基质	检测限
植物性饲料原料	<5mg/kg
犊牛、羔羊、泌乳期精料补充料	<1mg/kg
其他精料补充料	<3mg/kg
猪配合饲料	<1mg/kg
其他配合饲料	<3mg/kg

词条
词条说明
新希望集团
新希望集团有限公司是一家以现代农牧与食品产业为主营业务的民营企业集团，由*民营企业家刘永好先生于1982年创立，随改革大潮奋斗至今，已拥有世界第二、中国**的饲料产能，中国**的禽肉加工处理能力，是中国较大的肉、蛋、奶综合供应商之一
双胞胎集团
双胞胎集团成立于1998年，是一家专业从事生猪养殖、养猪服务、饲料销售、粮食种植与贸易、生猪屠宰与深加工为一体的全国性大型企业集团，集团下设分公司300余家，员工人数近2**。2021年集团饲料销量**1100万吨，生猪上市1165万标头，实现产值866亿元，是中国企业**，农业产业化国家重点**企业
粮食饲料行业呕吐毒素检测荧光定量
呕吐毒素简介呕吐毒素主要成分为DON（deoxynivalenol），，化学名为3α, 7α, 15一三羟基草镰孢菌-9-烯-8-酮，是一种单端孢霉烯的族化合物。而单端孢霉烯族毒素一共有150多种，呕吐毒素（DON）是单端孢霉烯族毒素中较重要的一种毒素。呕吐毒素主要是来自于镰刀菌属，包括为禾谷镰刀菌和黄色镰刀菌。呕吐毒素DON对于粮食谷物类的污染状况与产生毒素的菌株、温度、湿度、通风、日照等因素
圣农集团
圣农集团创始于1983年，总部位于福建省南平市光泽县，是集自主育种、孵化、饲料加工、种肉鸡养殖、肉鸡加工、食品深加工、余料转化、产品销售、冷链物流于一体，横跨农牧产业、食品、冷链物流、投资、能源/环保、配套产业、兽药疫苗七大产业的全封闭白羽肉鸡全产业链集团。圣农作为中国白羽肉鸡行业产业链较完整的企业，以*树一帜的“自繁·自养·自宰·深加工”的闭环管理，构建企业可持续发展的绿色循环经济产业链。