常见的几种二氧化硫检测方法

时间：2022-09-07

医院污水是指医院（综合医院、专业病院及其它类型医院）向自然环境或城市管道排放的污水。其水质随不同的医院性质、规模和其所在地区而异。每张病床每天排放的污水量约为200-1000L。医院污水中所含的主要污染物为:病原体（寄生虫卵、病原菌、病毒等）、物、漂浮及悬浮物、放射性污染物等，未经处理的原污水中含菌总量达10^8个/mL以上。

医院污水检测方法

粪大肠菌

A1 仪器和设备

A1.1 高压蒸汽灭菌器。

A1.2 干燥灭菌箱。

A1.3 培养箱：37℃。

A1.4 恒温水浴箱。

A1.5 电炉。

A1.6 天平。

A1.7 灭菌平皿。

A1.8 灭菌刻度吸管。

A1.9 酒精灯

A2 培养基和试剂

A2.1 乳糖胆盐培养液

A2.1.1成分

蛋白胨 20g

猪胆盐（或牛、羊胆盐） 5g

乳糖 5g

0.4％溴甲酚紫水溶液 2.5mL

蒸馏水 1000mL

A2.1.2 制法

将蛋白胨、猪胆盐及乳糖溶解于1000mL蒸馏水中，调整pH到7.4，加入指示剂，充分混匀，分装于内有倒管的试管中。115℃下灭菌20min。贮存于冷暗处备用。

A2.2 三倍浓度乳糖胆盐培养液

A2.2.1成分

蛋白胨 60g

猪胆盐（或牛、羊胆盐） 15g

乳糖 15g

0.4％溴甲酚紫水溶液 7.5mL

蒸馏水 1000mL

A2.2.2 制法

制法同附录A2.1.2。

A2.3 伊红美兰培养基（EMB培养基）

A2.3.1 成分

蛋白胨 10g

乳糖 10g

磷酸氢二钾 2g

琼脂 20g

2％伊红水溶液 20mL

0.5％美蓝水溶液 13mL

蒸馏水 1000mL

A2.3.2 制法

将琼脂加到900mL蒸馏水中，加热溶解，然后加入磷酸氢二钾和蛋白胨，混匀使溶解，再加入蒸馏水补足至1000mL，调整pH至7.2～7.4。趁热用脱脂棉和砂布过滤，再加入乳糖，混匀，定量分装于烧瓶内，115℃灭菌20min。作为储备培养基贮存于冷暗处备用。

临用时，加热融化储备培养基，待冷至60℃左右，根据烧瓶内培养基的容量，加入一定量的已灭菌的2％伊红水溶液和0.5％美蓝水溶液，充分摇匀（防止产生气泡）。倾注平皿备用。

A2.4 乳糖蛋白胨培养液

A2.4.1成分

蛋白胨 10g

乳糖 5g

氯化钠 5g

1.6％溴甲酚紫乙醇溶液 1mL

蒸馏水 1000mL

A2.4.2 制法

将蛋白胨、、乳糖及氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中，调整pH到7.2～7.4，加入1.6％溴甲酚紫乙醇溶液1mL，充分混匀，分装于内有倒管的试管中。115℃下灭菌20min。贮存于冷暗处备用。

A2.5 革兰氏染色液

A2.5.1 结晶紫染色液

结晶紫 1g

95％乙醇溶液 20mL

1％草酸铵水溶液 1000mL

将结晶紫溶于乙醇中，然后与草酸铵水溶液混合。

A2.5.2 革兰氏碘液

碘 1g

碘化钾 2g

蒸馏水 300mL

将碘与碘化钾混合，加入蒸馏水少许，充分摇匀，待完全溶解，再加入蒸馏水至300mL。

A2.5.3 脱色液

95％乙醇。

A2.5.4 沙黄复染液

沙黄 1g

95％乙醇 2g

蒸馏水 90mL

将沙黄溶于95％乙醇中，然后用蒸馏水稀释。

A2.6 染色法

染色的基本步骤为：1）涂片：在载玻片上滴加一滴生理盐水，用灭菌的接种环取菌落少许，与生理盐水混匀，涂布成薄膜；2）干燥：在室温中使自然干燥；3）固定：将涂片迅速通过火焰2～3次，以载玻片反面接触皮肤，热而不烫为度；4）染色：滴加结晶紫染色液，染色1min，水洗；5）媒染：滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗；6）脱色：滴加95％乙醇脱色，约30s，水洗；7）复染：滴加复染液，复染1min，水洗。

革兰氏阳性菌染色后呈紫色，革兰氏阴性菌染色后呈红色。

注：亦可用1：10稀释的石炭酸复红染色液作复染剂，复染时间为10s。

A3 检验程序

词条
词条说明
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