发热门诊日常检测医院空气微生物检测的方法

时间：2022-09-12

当下常见的检测方法是自然沉降法、撞击法、过滤法、液体撞击法等。各种方法各有优缺。我们应根据不同的需求选择不同的采样方法和采样器。

2.1 自然沉降法

常用的有营养琼脂培养基和血琼脂培养基等。面积为100平方厘米的平板培养基，暴露于空气中5min，与37℃恒温培养箱中培养24h后所生长的菌落数相当于10L空气中的菌落数。根据消毒技术规范在靠墙布点时，距墙1m。室内50m2的房间用3点法，室内≥50m2的用5点法。采样所用的营养琼脂统一配制，质量控制整个采样过程严格按照相关标准执行。根据奥梅梁斯的建议，空气中细菌数（cfu/平方米）=5000N/AT，N-平均菌落数（cfu/皿）、A-平板面积（平方厘米）、T-暴露时间（min）。

此方法简单方便，易操作，可以挑取单个进行再培养鉴定细菌的种类，也可检测出致病菌在医院空气中的浓度，但检测周期长，稳定性差，受外界人流气流等影响因素大，误差大，可以检测到的粒子大小也有限。并且现在这个传统的计算公式的准确性也存在争议。

2.2 撞击法

撞击法较主要用的是Anderson采样器。它的原理是：多级筛孔型采样器，六级多孔采样器分6级，每级400个孔，孔径分别为1.18mm、0.91mm、0.71mm、0.53mm、0.34mm、0.25mm，各级采集粒径分别为**级7.0um、*二级4.7-7.0um、*三级3.3-4.7um、*四级2.1-3.3um、*五级1.1-2.1um、*六级0.65-1.1um，空气流速介于1.08～23.29 m/s之间，通过惯性撞击将空气中不同粒径大小的微生物气溶胶粒子分别捕获在相应固体培养基上，接种到平皿计数串级撞式采样方式，通过称量各级滤纸做增加的重量来判断各级微粒所占比例。

Anderson采样器平皿计数：

空气含菌数（cfu/平方米）=[六级采样板的总菌数（cfu）/28.3（Lmin）采样时间]

计算空气中微生物大小分布：各级微生物粒子数/六级总菌数

此方法采集粒谱范围广，基本不受气流影响，采集效率高，逃逸少，很好地模拟了人类呼吸道的解剖学结构和空气动力学特征，但对于清洁度较高的地方，不适宜进行长时间大采集（培养基表面长时间吹会干燥，黏附细菌的指数会下降）。研究表明二级筛孔式微生物采样器与六级筛孔式微生物采样器的采菌率基本一致。二级筛孔式微生物采样器适用于测定空气中细菌总数采样，六级筛孔式微生物采样器更适用于空气细菌粒径大小研究使用。 2.3 过滤法

一定量的空气通过吸附剂（一般采用以灭菌的生理盐水）然后培养吸附剂中的细菌，计算出菌落数。**械过滤法、吸附法、静电法负离子和等离子体法、静电驻级过滤法等。过滤器的过滤层捕集微粒的作用主要有拦截效应、惯性效应、扩散效应、重力效应、静电效应。 2021/6/22 8:51:48 此方法采集的优点是准确有效，但过程较复杂。

2.4 液体撞击法

和固体撞击式采样器一样，是利用喷射气流方式将空气中的微生物粒子采集在小体积液体中，液体撞击式采样器在采样过程中因气流冲击和采样液的搅动，可以把微生物粒子团中的多个微生物释放出来，均匀分布在采样液中。

适用于高浓度的空气微生物采样。捕获率高，对于小粒子微生物尤为敏感。采样液有保护作用对微弱的微生物（如病毒、立克次体）也能采样。检测结果较准确，液体撞击式采样器结构简单使用方便，易消毒可反复使用。

综上所述，在空气采样器器缺乏的情况下，想要检测出医院空气的污染情况，较好选用自然沉降法，在某些特定情况下血琼脂培养基优于普通琼脂培养基。在实验仪器充足且丰富的情况下，只检测数目或对粒子大小分级时，较好选择Anderson采样器，在其他等对数目检测率要求较高的检测时，较好选择液体撞击法。

为了了解微生物的在医院室内空气中的数量，种类以及分布状况。我们今后研究应从以下几方面入手，首先，我们要明确目的。是要对科室的空气整体评估，还是调查出医院内那些科室一般会在院内感染那些微生物，作为目的菌。其次，根据目的确定方案。当要对院内整体情况分析的时，了解好各个采样器的优缺，进行选择并制定方案;当要对某科室的某种微生物进行检测时，参考文献查明目的菌的大小、运动情况，在不同培养基中的生长状况，根据其特性选取不同的采样器或者培养基等，做一些全国性的时间较长的大数据，进行感染率评估。

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