葡萄糖氧化酶的催化反应机理
1 葡萄糖氧化酶单一催化反应机理
葡萄糖氧化酶是同型二聚体结构,每个亚基分为两个不同的结构区域:
一个区域主要由β-折叠组成,以非共价键与黄素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinucleotide,FAD)辅酶分子紧密结合;
另一个区域则由4个α-螺旋支撑1个反平行的β-折叠组成,可与底物β-D-葡萄糖结合。葡萄糖氧化酶对β-D-葡萄糖表现出强烈的特异性,比催化α-D-葡萄糖高约160倍,且对L-葡萄糖和2-O-甲基-D-葡萄糖完全没有催化活性。
2 葡萄糖氧化酶的酶-过氧化氢酶联合催化反应机理
葡萄糖氧化酶通常与过氧化氢酶(hydrogenperoxidase,HPD)组成一个氧化还原酶系统。
当反应体系中只有葡萄糖氧化酶时,葡萄糖氧化酶能够催化β-D-葡萄糖氧化生成D-葡萄糖酸内酯和过氧化氢。
当反应体系中葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶同时存在时,首先葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成D-葡萄糖酸内酯和过氧化氢,然后过氧化氢酶催化过氧化氢生成水和氧气,最后水与D-葡萄糖酸内酯结合生成葡萄糖酸。
当反应体系中葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶和乙醇同时存在时,首先葡萄糖氧化酶催化β-D-葡萄糖生成D-葡萄糖酸内酯和过氧化氢,然后过氧化氢酶催化过氧化氢和乙醇生成水和乙醛,最后水与D-葡萄糖酸内酯结合生成葡萄糖酸。
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