厌氧培养箱的操作说明

时间：2025-01-21

作者：杭州川一实验仪器有限公司

厌氧培养箱是一种可在无氧环境下进行细菌培养及操作的装置，可培养难生长的厌氧生物在大气中操作时接触氧而死亡的危险性。

1. 厌氧培养箱应安放在温差较小、操作方便的位置，应避免阳光直晒和远离采暖设备，放置平稳;

2. 将混合气瓶、氮气瓶安放平稳，并分别装好减压阀(含压力表)，安置在适当位置;

3. 接上气路并检查气路，为防止漏气，必要时可在各接管处用密封胶粘合;

一、厌氧培养箱操作室厌氧环境形成：

1. 按使用要求放置好必要的附件和器具，并向操作室内放入二个无毒塑料袋;

2. 通电源开照明灯，开温控仪，调节所需温度及温度;

3. 操作室内放入1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂，并放入美兰指示剂(封闭);

4. 关紧取样室内外门，并抽真空校验;

5. 操作室内次置换(氮气置换)：

A. 先用橡皮管插入操作室内进气口，另一头插入塑料袋;

B. 接通氮气进气路，打开氮气控制阀1，使二只塑料袋充足氮气，关闭阀门1，然后扎紧袋口;

C. 把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧;

D. 把塑料袋内氮气渐渐放于操作室内，至全部放出。

6. 操作室二次置换(氮气置换)重复一次充氮过程，取样室先抽真空，并注意随时用脚踏开关开闭排气。

7. 操作室三次置换(混合气体置换)：(混合气体配比为N2 85%、H2 10%、CO2 5%)

A. 调换气路打开混合气阀3进气，充气时取样室先抽真空，并随时用脚踏开关开闭排气;

B. 混合气充满塑料袋后，关掉混合气阀并打开阀5，使混合气经过流量计，调整流量计，流量为每分钟10ml左右;

C. 把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内;

D. 通过三次换气后，操作室内气体含氧量已处于微量状态。

8. 操作室内打开粑粒除氧剂，接通除氧催化器电源进行催化除氧，一小时后开美兰指示剂(美兰安瓶)观察其变色情况，不变色为操作室内达到厌氧环境;

9. 开紫外线灭菌灯，室内进行灭菌处理，灭菌时间按具体实验自定。

2、菌种的置入和培养：

1. 检查取样室内门并关紧之;

2. 打开取样室外门，将菌种放入取样室后即关上外门;

3. 取样室充氮置换三次过程：打开真空泵，先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停，然后人工打开氮气阀2进气，使指针回复零位，关掉阀2。二次重复操作一次。三次操作时，使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停，然后打开阀4进混合气，使指针回复零位，后掉阀4。取样室充氮置换三次过程结束;

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