微生物的检测,无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义,本文对生长量测定法、微生物计数法、生理指标法和商业化微生物检测简要介绍了利用微生物重量,体积,大小,生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法,简要介绍了这些方法的原理,应用范围和优缺点。
一个微生物细胞在合适的外界条件下,不断的吸收营养物质,并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度**过了异化作用,则其原生质的总量(重量,体积,大小)就不断增加,于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长,即各细胞组分是按恰当的比例增长时,则达到程度后就会发生繁殖,从而引起个体数目的增加,这时,原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长,就引起了这一群体的生长,这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其他生物的生长,微生物的个体生长在科研上有困难,通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的,因此,微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标,同时,微生物在生产实践上的各种应用或是对致病,霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加,所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据,而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量,可以从其重量,体积,密度,浓度,做指标来进行衡量。
1. 微生物计量法
1.1 体积测量法
又称测菌丝浓度法,通过测定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是,取量的待测培养液(如10 mL)放在有刻度的离心管中,设定的离心时间(如5 min)和转速(如5000 rpm),离心后,倒出上清夜,测出上清夜体积为v,则菌丝浓度为(10-v)/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放,简便,快速,但需要设定一致的处理条件,否则偏差很大,由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物,结果会有偏差。
称干重法
可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10~20%。在离心法中,将体积待测培养液倒入离心管中,设定的离心时间和转速,进行离心,并用清水离心洗涤1~5次,进行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干,或采用红外线烘干,也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥,干燥后称重。如用过滤法,丝状可用滤纸过滤,细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤,过滤后用少量水洗涤,在40 ℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐,通常获取的微生物产品为菌体时,常采用这种方法,如活性干酵母(Activity Dry Yeast, ADY),一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
1.3 比浊法
微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定波长下的吸光值,判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时,可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中,即可随时测定其生长情况,而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。如使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计,在波长600 nm处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600,以此监控E.coli的生长及诱导时间。
1.4 菌丝长度测量法
对于丝状和一些放线菌,可以在培养基上测定时间内菌丝生长的长度,或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管,到入合适的培养基,卧放,在开口的一端接种微生物,一段时间后记录其菌丝生长长度,借此衡量丝状微生物的生长。
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词条
词条说明
1.水蒸气蒸馏利用的原理是液体的共沸。两种(或者更多)液体混合的时候,一般都会产生共沸,共沸物的组分都相对固定,例如乙醇和水产生共沸,乙醇的含量大约为95%,水5%。就是这个原理。2.因为很多**溶剂与水都有共沸点,有些化学反应温度又不能无限高,生成物又需要不断移出反应体系,才能促使反应持续进行,所以这样的化学反应就可以用水蒸气蒸馏,通入水蒸气,使产物与水形成共沸物,达到上述的目的。3.安全管不记
1、使用场所应保持清洁、通风良好、严禁存放挥发性**气体2、室内安装环境温度要求15~35℃;相对湿度20~80%,没有温度补偿;海拔高度0~2000米3、应避免阳光或其它射线直射到仪器上4、 仪器应放在可载重的稳定水平台面上,仪器背部距墙壁至少15cm以上,以保持有效的通风散热5、仪器应避免剧烈震动和持续振动。6、电源要稳定,不要与电焊机、电动机等设备共用一组电源,电压220V,频率50~60H
1、微波消解炉的维护1.炉腔要经常保持清洁,清洗时要切断电源,用软布檫拭,必要时可用洗涤剂清洗。2.消解炉的外表面也要保持清洁,在清洗时,防止水从通风口渗入,以免损坏内部的电路和工作部件。3.消解炉溶样完毕要及时用湿布檫拭炉腔,清除炉腔上的酸雾等污染物。4.如果消解炉长时间不用,应拔掉电源插头,放置在干燥、通风、没有腐蚀性气体的环境中,用**的仪器罩子罩好防尘。2、微波消解罐的维护1.溶样完毕要及
加热方式:通过红外加热石墨模块,实现整体均匀受热,防止了热量的散失。炉内平均温差较小,样品消解效果一致性,热传导效率高。 控制方式:智能化微处理器,可编辑20个消化程序,可设置温度和时间梯度。 控温方式:程序控制,曲线升温及直线升温。 显示系统:大屏幕触摸式液晶显示屏。 分体式环保废气回收装置,通过NaOH中和实验过程中产生的酸性气体。 废气回收装置凭借强有力的原装泵达到的抽吸性能。 整机具有过压
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