定海水质细菌检测、大肠菌群检测

时间：2019-05-01

目的比较多管发酵法（包括乳糖蛋白胨和EC―MUG培养基）与酶底物法（MMO―MUG培养基）测定水中大肠菌群和大肠埃希氏菌，为日常水质检测大肠菌群和大肠埃希氏菌选用一种佳检测方法。方法依照《生活饮用水标准检验方法》GB中的多管发酵法与酶底物法测定水中大肠菌群和大肠埃希氏菌，进行方法的适用性试验、灵敏度试验、水样加标试验及实际水样品检测应用。

结果适用性试验结果为多管发酵法与酶底物法检测结果显示有某些菌株的差别；灵敏度试验酶底物法约为1cfu100mL，多管发酵法约为1cfu100m；加标试验结果三种培养基法无明显差别；水样品检测两种方法的结果差别无显着性。结论多管发酵法与酶底物法检测水中大肠菌群和大肠埃希氏菌的结果差别无显着性，但酶底物法只需一种培养基在24h内同时检出大肠菌群和大肠埃希氏菌结果，操作更为方便、时间可节约24h-48h、结果观察直观容易。jsgfjc8788199

生活饮用水一般不检测大肠埃希氏菌、肠球菌的,也并没有选择五种指示菌（根本没这说法）,基本上都是以一类菌作为一个项目.

其实生活饮用水的检测项目有很多,但是如果没有特殊要求,一般只做三项：细菌菌落总数、大肠菌群、耐热大肠菌群,这些项目综合体现了生活饮用水的水质和污染情况.

如果你一定要问那两个项目的意义,其实大肠埃希氏菌、肠球菌和耐热大肠菌群的意义是基本一致的,都是体现水质受粪便污染的情况.其实耐热大肠菌群就是因为适合我国国情、检测成本低廉、方便直观,这样才以这个项目来代替大肠埃希氏菌的.

固定底物技术酶底物法（Defined Substrate Technology）采用大肠菌群细菌能产生β-半乳糖苷酶（β-D-galactosidase）分解ONPG（Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside）使培养液呈黄色，以及大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide）使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理，来判断水样中是否含有大肠菌群及大肠埃希氏菌。固定底物技术酶底物法可以选用国标中推荐粉状培养基（IDEXX公司的Coiliert试剂）来进行简便的操作；*确认试验；固定底物技术酶底物法检测时间短，只需24小时即可同时定量出水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌的MPN值。

操作步骤：

1) 将一个Colilert试剂倒入装有100ml水样的无菌取样瓶或无菌玻璃瓶中，混匀。（如图1）

2) 将瓶内的水样全部倒入51孔或者是97孔定量盘中，以手抚平定量盘背面以赶除孔穴内气泡，然后使用定量程控封口机进行封口。

3) 将定量盘放在36±1℃培养箱，培养24小时

注：如检测耐热大肠菌群（粪大肠菌群）则需放在44.5℃，培养24小时；如果培养时间**过28小时，则阴性结果则结果有效，如果为阳性结果则结果无效，需重做此水样。

4) 根据下面的结果解释读取结果。数出阳性格子数后对照MPN表得到结果。 blob

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