厌氧培养箱的操作规程

时间：2024-12-02

（一）操作室厌氧环境形成：
1. 按使用要求放置好必要的附件和器具;
2. 通电源开照明灯，开温控仪，调节所需温度;
3. 操作室内放入1000g钯粒（封闭）和500g干燥剂，并放入美兰指示纸（封闭）;
4. 关紧取样室内外门，并抽真空校验;
5. 操作室内初次置换（氮气置换）：
A. 把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧
B. 接通氮气进气路，打开氮气控制阀1，使手套鼓起，关闭阀门1，然后扎紧袋口;
6. 操作室D二次置换（氮气置换）重复一次充氮过程，取样室先抽真空，并注意随时用脚踏开关开闭排气。如此连续三次氮气置换。
7. 操作室D四次置换（混合气体置换）：
（混合气体配比为N2 85%、H2 10%、CO2 5%）
A. 调换气路打开混合气阀3进气，充气时取样室先抽真空，并随时用脚踏开关开闭排气;
B. 关掉混合气体阀3，并打开阀5，使混合气体经过流量计，调整流量计，流量为每分钟10ml左右;
C. 混合气体重复2-3次转换，经过上述过程，基本形成厌氧环境。
8. 操作室内打开粑粒除氧剂，接通除氧催化器电源进行催化除氧，一小时后打开美兰指示纸观察其变色状况，不变色为操作室内达到厌氧环境;
9. 开紫外线灭菌灯，室内进行灭菌处理，灭菌时间按具体实验自定。
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