目的:优化枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)启动子和表达宿主,构建其高效的表达系统,为重组枯草芽孢杆菌的研究和应用奠定基础。
方法:以β-半乳糖苷酶编码基因为报告基因,以诱导型的枯草芽孢杆菌麦芽糖操纵元启动子为调控元件、大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒为载体骨架,构建枯草芽孢杆菌高效表达载体pGJ222,将其电转化到B.subtilis 1A747菌株后进行诱导表达试验和葡萄糖抑制试验。利用同源重组的方法,用枯草芽孢杆菌组成型启动子P43替换了B.subtilis**型菌株1A747麦芽糖操纵元的上游调控序列,得到优化重组表达宿主菌B.subtilis BCYL,将pGJ222转入B.subtilis BCYL后,对优化的表达系统进行诱导表达试验和葡萄糖抑制试验。分别用PCR扩增大肠杆菌和枯草芽孢杆菌维生素B12合成前期途径的谷氨酰-tRNA合成酶编码基因hemA,构建其表达载体,并将其转化B.subtilis BCYL中进行诱导表达检测。
结果:成功构建了枯草芽孢杆菌高效表达载体pGJ222,并实现了β-半乳糖苷酶的高效表达,其表达量占总可溶性蛋白的18%;质量分数5%的麦芽糖诱导24 h β-半乳糖苷酶活达到16 U/mL。成功获得了优化重组表达宿主菌B.subtilis BCYL,其可使β-半乳糖苷酶活性有大幅度提高,在质量分数5%麦芽糖诱导24 h β-半乳糖苷酶活达到21 U/mL,葡萄糖的抑制作用明显减弱。
结论:以β-半乳糖苷酶编码基因为报告基因,以诱导型的枯草芽孢杆菌麦芽糖操纵元启动子为调控元件、大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒为载体骨架,构建枯草芽孢杆菌高效表达载通过对启动子和表达宿主的优化,获得了枯草芽孢杆菌高效表达系统,为枯草芽孢杆菌基因工程研究提供了有力工具。
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针对肉鸭育雏方面,再强调下几个重点。**,就是温度。育雏期间的温度要求一定是稳定的,不能忽高忽低。过热会出现热应激。热应激的表现是,距离热源的鸭子多,张口呼吸,远离热源,靠墙边沿,拥挤在饮水器边,鸭子羽毛湿透。严重的情况还有可能会脱水,导致死亡率升高。如果育雏舍的温度过低,鸭苗会出现冷应激。冷应激的表现是:鸭苗聚集在热源附近,或者温度偏高的地方,界限明显。排泄的粪便有糊肛现象。有的鸭子伸到其它鸭苗
决定这批肉鸭是否赚钱的因素是什么?如何才能限度提高养鸭效益?养鸭如何降低料肉比?养鸭有风险,入行需谨慎。为什么这样说呢?**,从事的经济活动是养殖活物,只要是活着的动物,那么受到的影响因素就比较多,整个生产周期也是一个动态的,任何一个小方面的改变都能影响到较终的经济效益。*二,疾病压力大,尤其是霉菌、病毒等方面的疾病造成的伤亡大,损失大。*三,市场价格变化快,要出栏了,价格低,出栏赔本,不出赔的更
*四关于放栓的时间,一天之中任何时间都可以,一般是选择上午9点左右。*五配制消毒润滑剂,用于消毒和润滑棉栓前端,大家可以看放栓方法视频,操作有一个用小喷壶喷棉栓的动作,喷壶里面装的就是消毒润滑剂,使用起来很方便。消毒润滑剂是这样配制的:20毫升的润滑剂,180毫升的生理盐水,2-3%新洁尔灭5毫,充分混合在一起,得到205毫升的消毒润滑剂,装到小喷壶里备用就可以了。*六关于放栓大家看放栓方法视频应
三、枯草芽孢杆菌的活水作用水活是指水色和透明度有变化。水色和透明度的变化是水变化的两种表现特征,其本质上应该是指水中的**物能及时转化为浮游饵料,尽量不要**物沉积到池底,形成死水。枯草芽孢杆菌可以增强水域生态中细菌族群的分解功能,不但可以促进藻类的生长,还可以作为浮游动物的饵料而进入生物链,其活水的作用是比较容易理解的。四、 枯草芽孢杆菌的爽水作用爽水的基础是嫩,即浮游植物处于种群增长期,同时浮
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