许多高温DNA聚合酶,如Taq DNA聚合酶、Tth DNA聚合酶等扩增的PCR产物在3’-末端后都带有一个**的碱基A,这样的PCR产物可以用3’-末端后带有一个**碱基T的载体方便地进行克隆。pSURE-T载体是为简化PCR产物的克隆而设计的。pSURE-T是一种新颖的pUC系列T载体,和传统T载体ECOR V切开后加T方法不同,pSURE-T通过Xcm I酶切后使其多克隆位点两侧的3’末端直接产生未配对的T碱基,因此有更高的重组效率。其多克隆位点更多的单切点和b-半乳糖苷酶阅读框架的调整大大方便了克隆的蓝/白筛选。插入位点两端*特设计的两个PstI位点使插入片段可以用Pst I单酶切进行检测,也可以用非常廉价而*的EcoR I和Hind III 双酶切进行检测。可以用M13通用引物和T7启动子引物对PCR产物进行测序。pSURE-T含有T7 RNA聚合酶的启动子,可以对插入片段进行体外转录。
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