带你了解为什么细胞培养*非HEPES莫属

时间：2021-04-16

什么是细胞培养？
细胞培养本身就是细胞的克隆，它通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来，所以可以说细胞培养技术是生物技术中较核心、较基础的技术。但说到细胞培养我们就不得不提起HEPES这个有着两性离子的缓冲剂了。
HEPES
HEPES（4-羟乙基乙磺酸）CAS号为：7365-45-9，是一种白色结晶粉末，溶于水，是一种弱酸，其pH缓冲范围是6.8-8.2，是生物化工中重要的生化制剂，也是生物学研究领域中被认为是重要的缓冲剂之一。
为什么HEPES会是细胞培养的*？
这是由于培养中细胞的生长和代谢会导致培养基的环境pH值发生剧烈变化，因此，为了维持可以稳定培养细胞的环境，是有必要向其中添加适量的某些生物缓冲液。但是，市场上有如此多的生物缓冲液和替代品可用于细胞培养，为什么要使用HEPES？通常，大多数细胞的较佳培养环境是pH 7.2-pH 7.4 ，HEPES的缓冲范围恰好在pH 6.8-pH 8.2内，这对细胞培养是有利的。与其他缓冲液（例如PBS（盐缓冲盐水）和TRIS）相比，HEPES在维持细胞培养基的pH值方面具有更高的稳定性，这也是HEPES广泛用于细胞培养，组织培养，蛋白质纯化和提取，*沉淀，细胞裂解，活细胞成像和其他生物/生化研究的原因。
注意事项：
HEPES在细胞培养基中的建议较终工作浓度通常为10mM至25mM。较高的浓度可能会导致在长时间的孵育过程中对细胞产生毒性。
如何处理和存储HEPES？
HEPES粉具有耐高温且熔点高达200℃的特性，因此不会因高压灭菌而降解，也可以使用0.2微米针筒式过滤器过滤HEPES缓冲液。如果将HEPES水溶液暴露在环境光下三小时，则会产生细胞毒性的（H 2 O 2），因此应注意，HEPES水溶液必须远离光线，以免影响实验结果。
不管再适合的东西，我们都要掌握它的特点和规律，所以多了解产品的特性，这样才能让其发挥出更大的功效。

词条
词条说明
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