在各种非放*分析方法中,化学发光*分析(CLIA)具有灵敏度高、检测范围宽、精密度好、标记物稳定、可实现全自动化、应用范围广等优点,以酯衍生物为发光标记物的CLIA的特点是:标记简单、标记物稳定、不需要催化剂、自然本底低、受外界干扰因素少、信噪比高、发光体系简单等。
酯是盐的一个总称,指一类可用作化学发光标记物的化学物质,酯有多个不同的系列,包括盐DMAE-NHS、酯NSP-DMAE-NHS、盐NSP-SA等,接下来将介绍酯DMAE-NHS的合成方法和性能、优势介绍。
酯DMAE-NHS合成路线:
1.将4-羟基-3,5-二与N-羟基琥珀酰亚胺溶解在N,N-二甲酰胺(DMF)中,在缩合剂的作用下反应得到粗产品,重结晶后得纯产品;
2.将1所得产品1-((4-羟基-3,5-二甲酰)氧基)-2,5-烷二酮与-9-羰基氯溶解在无水吡啶中,在催化剂的作用下加热反应得到粗产品,柱层析分离提纯。
3.将2所得产物与酸二溶解在无水甲中反应,将得到的混合物过滤,滤渣洗涤然后重结晶得到目标产物酯类化学发光底物DMAE-NHS。
DMAE·NHS的发光性能介绍
1.对DMAE-NHS发光性能的研究表明,DMAE-NHS的发光为闪光,0.4s时发光强度达到较大,发光半衰期约为0.9s,发光强度为6.11×1018cps/mol。发光启动试剂的组成对其发光强度有影响,表面活性剂如CTAC,TritonX-100,Tween-20等能增强其发光。
2.DMAE-NHS与抗体偶联物DMAE-NHS-Ab的发光性能相似,DMAE-NHS与Ab的分子比为2.4时其发光强度为1.8×1019cps/molAb。DMAE-NHS及DMAE-NHS-Ab具有良好的热稳定性,4℃或冰冻下,在pH7.0的PB缓冲液中,半年后它们的发光活性或*活性基本没有下降,室温或37’C下,由于水解而降低发光活性,它们的热稳定性随温度升高而降低,随熔液pH值增大而降低,
DMAE-NHS的优势介绍
研究结果表明,DMAE-NHS具有良好的发光性能,易与抗体偶联,偶联物稳定,发光体系简单,是一种理想的化学发光*分析标记物,以DMAE-NHS做发光标记物建立的TSHCLIA、TSHBAS-CLIA和TT4BAS-CLIA方法,标准曲线线性好、信噪比高、检测范围宽、具有较高的灵敏度,良好的精密度、准确性和健全性,与IRMA方法及CibaComingCLIA的临床测量值相关性良好。
酯发光体系优势明显,在体外诊断方面具有更好的灵敏性,目前应用酯化学发光*分析技术已逐渐发展为医药检测、诊断分析、环境检测、食品检测等领域的一种趋势。德晟科技提供质量可靠的酯、盐产品,可满足科研机构和试剂盒生产企业的科研、生产需求。
词条
词条说明
在疫情的影响下,病毒保存液也大量出现在大众视野中。可是我们对它的了解仅仅只限于知道它是采集病毒做检测的,可是它本身的一种能力是什么呢?为什么它又叫灭活病毒保存液呢?我们只能根据字面意思来理解就是灭掉活的病毒来进行保存之后做研究。可是真的就这样简单吗?这只是很多不了解的人的想法。首先我们来看看为什么叫灭活? 什么是灭活?灭活是指用物理或化学手段杀死病毒、细菌等,但是不损害它们体内有用抗原的方法。
样本保存液或病毒保存液是病毒采样管里添加的用于采集病毒样本的溶液,有无色的灭活型保存液和有色的非灭活型保存液。非灭活保存液之所以有颜色是因为其中含有有颜色的成分,那么它用的是用的红还是红呢?非灭活型病毒保存液与灭活型不同,它不需要对样本中的病毒进行灭活,相反它还有尽可能让病毒在采样管的保存液中存活时间增长,这样有利于保证病毒的完整性状,以便提高后续的核酸检测准确率或用于其它研究实验。而病毒在
Tris饱和为浅黄色透明液体,下层为相,,上层为Tris 缓冲液pH>7.8,是用Tris-HCl(pH8.0)饱和过的重蒸,有刺激性气味,内加有抗氧化的8-羟基。Tris饱和用于分离DNA。 Tris饱和的配置:冰箱取出重蒸,室温放置,之后68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂,加8-羟基至0.1%和β-巯基至0.2%
现市场上常见的病毒样本保存液的设计或针对于核酸的保护,会指向病毒功能蛋白的保护。例如针对核酸的样本保存液中,通常含有dnase/rnase和其他功能酶的抑制作用,破坏功能蛋白,而主要保护功能蛋白的病毒样本保存液,对于核酸的保护效果又不佳。第一类病毒样本保存缓冲液更适用于pcr方法或其他分子检测方法的使用,而第二类病毒样本保存缓冲液更适用于病毒抗原或抗体的检测,比如elisa或胶体金、荧光等快速检测
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