Tris盐酸缓冲液用于蛋白质SDS-PAGE电泳

时间：2022-01-26

Tris即三羟甲胺-盐Tris-HCl缓冲液，适用于大多数蛋白质、核酸相关的研究实验，通常用它作为缓冲液应用在蛋白质SDS-PAGE电泳实验中，电泳效果好分辨率高。

由Tris组成的生物缓冲液，常配成pH值为6.8，7.4，8.0，8.8。其pH值随温度变化相对较大。一般来说，温度每升高一度，PH值下降0.03。1M Tris-HCl 6.8和1.5M Tris-HCl 8.8是SDS-PAGE较常用的试剂。Tris可溶解核酸和蛋白质。

SDS-PAGE是相当普遍的聚酰胺凝胶电泳，是以聚酰胺凝胶作为支持介质的电泳技术，适合蛋白质以及寡核苷酸的分离。聚酰胺凝胶呈微观网状结构，具有分子筛效应，分为非变性聚酰胺凝胶电泳（Native-PAGE）和SDS-聚酰胺凝胶（SDS-PAGE）两种形式。

在蛋白质SDS－PAGE不连续电泳实验中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH值6.7，分离胶pH为8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。在浓缩电泳凝胶中，其pH值呈弱酸性，因此甘氨酸只有很少量的会解离，其在电场的作用下，泳动效率低；而氯离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压梯度，压着蛋白质分子聚集到一起，浓缩为一狭窄的区带。

当样品进入分离胶后，由于胶中pH的增加，呈碱性，甘氨酸大量解离，泳动速率增加，直接紧随氯离子之后，同时由于分离胶孔径的缩小，在电场的作用下，蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。

所以，pH对整个反应体系的影响是至关重要的，实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况，应首要考虑该因素，当然其他的因素也可以从多方面考虑。

Tris由Tris与混合制得，像氨基丁三醇、缓血酸胺、2-氨基-2-（羟）-1,等都是指的Tris，是德晟生产的重要原料，还可以用于其它各种缓冲液体系。

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