Tris作为缓冲液的常青树，有什么妙用

时间：2022-01-26

Tris作为生物缓冲剂家族中的中流砥柱，是合成Bis-Tris，TES，TAPS中是必不可少的反应物。后面几种均为生物化学实验和分子生物学实验中经常使用的缓冲剂，他们结构中都含有Tris的分子结构。下面我们来列举tris和以他合成的Bis-Tris这两种常用化学物质的应用场景，浅析它的优越化学性能。

三羟（行业常称作Tris），25°C下其pKa为8.04，缓冲范围7.0~9.0。其常用实验如下：

（1）常用于凝胶电泳缓冲液中，例如TAE或TBE；

（2）常用于制备Laemmli缓冲液；

（3）常与甘氨酸和SDS一起制备运行缓冲液和上样缓冲液；

（4）可以用作阴离子交换层析中的结合缓冲液和洗脱液；

（5）被用作RNA杂交和DNA裂解的缓冲液。

在Tris的使用中，需要注意：Tris缓冲液的pH值受温度和浓度影响很大，我们在配制过程中要特别注意应用环境的影响因素；Tris的伯胺基在特定条件上与多种分子发生反应，包括RNA抑制剂，常见金属如Ag+，Co2+和Cu2+等，酶，Tris不适合测定。

Bis-Tris，双(2-羟乙基)氨基(三羟)，两性阴阳离子缓冲剂，25°C下pKa为6.46，pH缓冲能力范围为5.2~7.8。其应用领域如下：

（1）作为各种类型电泳的样品缓冲液，凝胶缓冲液和储存保质缓冲液；

（2）作为阴离子交换色谱法中的缓冲液；

（3）被用于卤代烷烃脱卤酶结晶过程的X射线晶体学研究；

（4）低导电性和高灵敏度，是核磁共振光谱的有效缓冲液；

（5）与人肝脏型脂肪酸结合蛋白（FAB）相互作用并影响蛋白质动力学。

Bis-Tris与Fe3+和Cr3+形成络合物，与许多常见金属形成络合弱复合物，因此在含有金属离子的溶液中使用时，应考虑其络合因子的范围。此外，在有系统压力变化的反应釜，可使用Bis-Tris缓冲溶液。Bis-Tris是盐的替用品以避免其高毒性，但同样不测定。

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