广大单抗工作者可能都遇到这个问题,IgM类单抗无论如何都纯化不好。用进口的柱子也很难得到理想的结果,不是得率太低就是活性不好,长期以来困扰着大家。赛尔维的科研人员经过深入细致的大量研究与优化终于取得重大成果,让IgM类单抗的纯化变得简单,可操作性强;抗体活性得到较大的保持。这一成果经反复验证得以肯定,从此您不用再为它发愁了。产品货号C080202
IgM类小鼠单抗体纯化试剂盒使用说明书
C080202(50ML纯化量)
试剂原理:
本试剂盒利用不同蛋白需要的沉淀试剂和沉淀条件不同,通过大量实验分析验证而得到的一个与传统沉淀纯化有较大不同的精细的具有高活性、高产率、快速以及良好重复性的单抗体的纯化方法。
试剂特点:
本试剂盒特点在于纯化操作的简单化、所得抗体的高活性和高纯度。实验表明,本试剂盒可以得到以上纯度的抗体;并且由于配方考究,抗体在纯化过程中几乎没有损伤,完全保持应有的活性,实际应用较好。
适用范围:
本试剂盒适用于小鼠IgM类单抗体腹水的纯化,其它类或者亚类单抗的快速纯化请使用本公司其它货号产品。
试剂组成:
试剂名称 数量 试剂名称 数量
纯化液A 50ml 纯化液E 5ML
纯化液B 50mL 透析试剂(固体粉末) 配8L量
纯化液C 50mL 透析袋 4份
纯化液D 50mL 说明书 1份
纯化步骤:
1、 从冰箱中取出试剂盒开盖放置室温,然后再将单抗体腹水从冰箱中取出,室温避光复温15分钟,随后用自来水边冲边摇匀快速解冻。
2、 将化开的单抗体腹水12000RPM 20-30℃(或室温)离心10-20分钟。
3、 先吸弃较上面浮沫和油脂,然后将上清转出到另一个干净容器或离心管;按每1毫升单抗体腹水加入纯化液A(加前确定没有试剂析出,如有析出摇晃溶解即可) 1毫升(必须精确),室温避光倒转30分。
4、 8000RPM 20-30℃离心10-20分钟,沉淀用纯化液B溶解到抗体腹水1/2体积,再按此体积每1毫升加入纯化液C (加前确定没有试剂析出,如有析出摇晃溶解即可)1毫升((必须精确),室温避光倒转10分钟。
5、 8000RPM 20-30℃离心10-20分钟,弃沉淀收集上清;每1毫升上清液加纯化液D(加前确定没有试剂析出,如有析出摇晃溶解即可) 1毫升(必须精确),室温避光倒转20分钟。
6、 8000RPM 20-30℃离心10-20分钟,收集沉淀用纯化液B收集溶解沉淀到抗体腹水体积的1/3,并扎入透析袋。
7、 透析液用纯水溶解透析试剂粉末到8L,将要透析的抗体袋子放入。抗体体积:透析液体积=1:100,4℃透析过夜。收集透析后抗体。
8、 以透析后抗体体积:纯化液E的体积=9:1的比例加入纯化液E摇匀,静置5min。8000RPM 20-30℃离心10-20分钟,弃沉淀收集上清
词条
词条说明
提供的产品包括多克隆抗体、单克隆抗体、抗原、抗原抗体标记物、以及各种生化试剂、*检测试剂盒等
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公司名: 洛阳佰奥通实验材料中心
联系人: 李经理
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