【免疫学检测】免疫分析法的标记技术

    基本原理:采用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原 -抗体反应,通过对复合物中的标记物的测定,达到对反应进行监测的目的。


    标记技术主要类型:放射技术、酶技术、荧光技术、化学发光技术


    放射标记技术(RIA)

    基本原理:根据抗原抗体特异性结合的原理,以放射性同位素标记抗原或抗体,根据射线的多少定性或定量测定待检标本中抗体或抗原的量。

    酶标记技术(ELISA)

    基本原理:指酶标记抗体或酶标记抗体进行的抗原抗体反应,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。

    磁敏分析(MI)

    基本原理:通过分子靶标绑定方法,将纳米级导磁铁珠(磁珠)与待测蛋白抗体结合并固化于巨磁阻(GMR, Giant Magneto Resistance) 芯片表面,基于GMR芯片的巨磁阻效应,芯片表面的磁珠会剧烈影响GMR的原态电阻,根据GMR电阻变化率实现定量测定样本中待测抗体含量。磁敏分析技术属于生物芯片技术家族成员。

    荧光分析(FIA)

    基本原理:以荧光素标记抗体或抗原作为示踪剂的一种新的分析技术,其原理与ELISA相似。该法既可对液体中的抗原和抗体定量,也可对组织切片中的抗原、抗体进行定性和定量。一般由于样品、试剂的自身荧光和激发光的散射,本底荧光高,影响了测定的灵敏度。一般以镧系元素作为荧光标记(示踪剂)。示踪剂与相应抗原或抗体结合后,借助荧光检测仪察看荧光现象或测量荧光强度,从而判断抗原或抗体的存在、定位和分布情况或检测受检标本中抗原或抗体的含量。

    胶体金技术(CGIA )

    基本原理:以胶体金作为示踪标记物,主要利用了金 颗粒具有高电子密度的特性 ,在金标蛋白结合处,在显 微镜下可见黑褐色颗粒,当 这些标记物在相应的配体处 大量聚集时,肉眼可见红色 或粉红色斑点。

    化学发光技术(CLIA )

    基本原理:利用化学或生物发光系统作为抗原抗体反应的指示系统,借以定量检测抗原或抗体的方法,发光物质可直接作为抗原抗体的标记物,也可以游离形式用于催化剂(酶)和辅助剂标记的抗原或抗体的发光反应中。


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