【病毒灭活试验】灭活病毒保存液怎样灭活和裂解病毒？

时间：2021-05-30

灭活保存液是病毒保存液的一种，主要用于灭活病毒以防二次感染，这种病毒保存液的特点是能够快速地灭活病毒，将病毒蛋白膜衣壳降解掉，同时将病毒核酸释放出来，新冠病毒就是释放和降解RNA病毒，这样可以进行逆转录后PCR扩增实验，达到利用核酸检测病毒的目的。

灭活型病毒保存液中除了含有裂解的成分，通常还含有使蛋白变性破坏膜结构的去污剂、生物缓冲剂还有防止核酸酶降解核酸的抑制剂，以及维持核酸结构稳定的试剂等。裂解体系还可能加入蛋白酶，将蛋白切成小片段，促进蛋白质与核酸的分离。

裂解病毒的方法有很多种，一般比较常见的两种是加热法和浓盐法：

浓盐法是用高浓度的盐可以破坏核酸与蛋白质之间的次级键，使核蛋白解联从而把病毒核酸释放出来。通常使用盐酸胍、异硫氰酸胍或非胍盐裂解盐，可以直接裂解灭活病毒，不需要加热处理样本，简便快捷

加热法是通过加热到80℃~100℃的温度值基础上，因为一般样本都是-70℃冷冻的，一般需要加热5~10分钟，这种操作比较简单，只用一步就可以得到用于核酸PCR扩增的模板，不需要任何离心、抽提等操作步骤，比常用的CheleX100提取方法和苯酚/氯仿等方法要快。这种方法虽然简单快捷，但是提取的核酸含量会比较少。

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【病毒灭活试验】灭活病毒保存液怎样灭活和裂解病毒？
灭活保存液是病毒保存液的一种，主要用于灭活病毒以防二次感染，这种病毒保存液的特点是能够快速地灭活病毒，将病毒蛋白膜衣壳降解掉，同时将病毒核酸释放出来，新冠病毒就是释放和降解RNA病毒，这样可以进行逆转录后PCR扩增实验，达到利用核酸检测病毒的目的。灭活型病毒保存液中除了含有裂解的成分，通常还含有使蛋白变性破坏膜结构的去污剂、生物缓冲剂还有防止核酸酶降解核酸的抑制剂，以及维持核酸结构稳定的试剂等。裂
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