如何对病毒进行检测？

时间：2021-12-21

如何对病毒进行检测？

与细菌和寄生虫等不同，由于病毒颗粒小，很难通过光学显微镜直接观察，病毒载量高（通常大于107个）时通过组织切片样本进行负染增强后，可使用电子显微镜观测,但是通常到了这个时候，病人的“含毒量”也已经很大了。现在更常用的病毒检测从方法学上主要分为核酸测定和*测定两大类。

在病毒感染早期，病毒数量很少，对于已知的病毒种类，核酸测定可以捕获到病毒核酸特定的序列，从而抓住病毒入侵的“蛛丝马迹”。但核酸检测本身有很多步骤，从制备样本开始，鼻拭子、咽拭子等样本比血液样本中含有更多杂质，成分也更加复杂，这些成分很多会抑制核酸检测试剂，降低检出率。因此需要去除杂质，将病毒的序列纯化提取。核酸样本储存和运输也是非常重要的环节，比如新冠病毒是RNA病毒，而RNA不稳定，非常*降解，因此存储条件至关重要。这些步骤中出现任何一个问题都可能导致病毒核酸无法检出。

*测定是一种间接检测方法，主要是寻找针对该病毒的特异性抗体，以检测抗体来代替直接检测病毒。举例来说，如果有人感染了麻疹病毒，且没有接种过疫苗，那么身体里就会产生针对麻疹病毒的抗体。同样，假设被新冠病毒感染，我们的身体也会产生针对新冠病毒的抗体。IgM是初次体液*应答中较早出现的抗体，是机体抗感染的“先头*”，在感染的初期起作用但维持时间短、消失快。一般在感染新冠肺炎后的7天，发病3天左右，血液中就会产生特异性IgM抗体。将IgM抗体检测和核酸检测互相印证，就可以较大提高新冠肺炎的诊断率。而IgG抗体则产生较晚，但维持时间长、消失慢、浓度高，可作为远期感染的指标。并且对于病毒**和疫苗研发的意义也非常重大。通过对恢复期患者血清中抗体提取和纯化，可以有望寻找到对病毒有明显抑制作用的“中和抗体”，这可以快速应用的临床危重症患者的**，也可以用于预防性疫苗的研发。

无论是核酸检测，还是抗体检测，都是“有的放矢”，对已知病毒进行检测。而高通量测序在病毒检测，尤其在新病毒发现和鉴定中发挥着大作用。对于未知病毒鉴定来说，首先需要完成病毒的分离和纯化，通过对未知病毒核酸序列进行测序和鉴定。通过对临床病毒基因组进行连续分析，就可以跟踪病毒随时间的突变，这对揭示病毒在时空中传播的偏好和特点，实时监控病毒在易感人群中的传播更为重要，也可以为公共卫生干预手段提供信息，让我们g好地知道病毒如何变异，如何传播，从而让我们更好地预测未来，并希望能预防病毒的进一步传播。

传统的检测方法是在实验室中对病毒标本进行核酸扩增、凝胶电泳、*荧光标记等分析，随着检测技术的不断发展，新的病毒检测技术在灵敏度和准确性方面进行了很大提升。例如数字PCR、杂交捕获*荧光、胶体金*分析、CRISPR（规律间隔成簇短回文重复序列）基因编辑技术、下一代测序等新技术不断发展。

快速、准确是检测中较重要的两个指标。目前发展前景z好的，是可便携式的快速检测技术，可以将病毒快速检测部署到医院甚至社区中。一体式的仪器可以在全封闭检测芯片完成核酸提取及检测，可适用于急诊、ICU、救护车、社区、家庭、火车站等环境下快速识别感染人群，这为病毒防控提供了g有力的武器。

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