微生物实验室主要应用于微生物学、生物医学、生物化学、动物实验、基因工程以及生物制品等领域,它不同于一般的实验室工程或净化工程。在微生物工作中,菌种的接种移植是一项主要操作,这项操作的特点就是要保证菌种纯种,防止杂菌的污染。在一般环境的空气中,由于存在许多尘埃和杂菌,很易造成污染,对接种工作干扰很大。而无菌室的存在对于菌种的保护起到了很好的作用,减少了污染情况,所以无菌室也称接种室,是系统接种、纯化菌种等无菌操作的实验室。
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无菌室工作规程:
(1)无菌室。每次使用前开启紫外线灯照射30min以上,或在使用前30min,对内外室用5%喷雾。
(2)用肥皂洗手后把所需器材搬入外室;在外室换上的工作服、工作帽和工作鞋,戴好口罩,然后用2%煤皂液将手浸洗2分钟左右。
(3)将各种需用物品搬进内室进行清点、就位,用5%在工作台面上方和操作员站位空间喷雾,返回外室,5~10min后再进内室工作。
(4)接种操作前,用70%的酒精棉球擦手;进行无菌操作时,动作要轻缓,尽量减少空气波动和地面扬尘。
(5)工作中应注意。如遇棉塞着火,用手紧握或用湿布包裹熄灭,为避免燃烧扩大切勿用嘴吹;如遇有菌培养物洒落或打碎有菌容器时,应用浸润5%的抹布包裹后,并用浸润5%的抹布擦拭台面或地面,用酒精棉球擦手后再继续操作。
(6)工作结束,立即将台面收拾干净,将不应在无菌室存放的物品和废弃物全部拿出无菌室后,对无菌室用5%喷雾,或开紫外线灯照射30min。
无菌室的设置:
根据经济和科学的角度来讲,无菌室设置的基本要求如下:
(1)门应设在离工作台远的位置上,内间应当设拉门,以减少空气的波动;外间的门好也用拉门,要设在距内远的位置上。
(2)无菌室应有内、外两间,内间是无菌室,外间是缓冲室。房间容积不宜过大。内间面积2×2.5=5m2,外间面积1×2=2m2,高以2.5m以下为宜,都应有天花板。
(3)无菌室容积小而严密,使用一段时间后,室内温度很高,故应设置通气窗。通气窗应设在内室进门处的棚上(即离工作台远的位置),为双层结构,外层为百叶窗,内层可用抽板式窗扇。通气窗可在内室使用后,以流通空气。有条件可安装恒温恒湿机。
(4)在分隔内间与外间的墙壁或“隔扇”上,应开一个小窗,作接种过程中必要的内外传递物品的通道,以减少人员进出内间的次数,降低污染程度。小窗宽60cm、高40cm、厚30cm,内外都挂对拉的窗扇。
无菌室内设备和用具:
(1)外室应有的工作服、鞋、帽、口罩、盛有来苏儿水的瓷盆和毛巾、手持喷雾器和5%溶液等。
(2)内室应有酒精灯、常用接种工具、不锈钢制的剪、镊子、70%的酒精棉球、工业酒精、载玻璃片、特种蜡笔、记录本、铅笔、标签纸、胶水、废物筐等。
(3)无菌室内的工作台,不论是什么材质、用途的,都要求表面光滑和台面水平。
(4)在内室和外室各安装一个紫外灯(多为30W)。内室的紫外线灯应安装在经常工作的座位正上方,离地面2m,外室的紫外线灯可安装在外室。
无菌室的:
(1)紫外线照射:在每次使用无菌室前进行。紫外线有较好的效果。通常应开启紫外线灯照射30~60min。
(2)薰蒸:这是无菌室措施。无菌室使用了较长时间,污染比较严重时,应进行薰蒸。可用甲醛、乳酸或薰蒸。
(3)喷雾:在每次使用无菌室前进行。喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降,防止桌面、地面上的微尘飞场。可用5%喷雾。
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