细胞STR鉴定

时间：2020-11-12

细胞STR鉴定

细胞STR鉴定方法

要求能提供细胞的一般和特殊的生物学性状指标。一般特性指标包括：细胞的一般形态、特异性结构、细胞生长曲线和分裂指数、倍增时间、接种率、染色体分析、同工酶检查、DNA指纹图谱等。特异性指标常依据细胞种类和功能的特异性进行鉴定，比如，若为腺细胞则一般鉴定是否有特殊产物包括分泌蛋白或激素产生；若为**细胞，还应能够证明细胞确系来源于**组织而非其它，并仍保留有**组织的特性，为此常需做集落形成实验、裸鼠致瘤实验以及对正常组织的侵袭实验等。

一、对正常细胞系的鉴定

对正常细胞系的鉴定主要围绕以下四个方面进行：（1）鉴定细胞的种系来源：常用方法主要有染色体分析、同工酶分析、DNA指纹图谱等技术。（2）鉴定细胞的组织来源：可通过形态学手段、检测组织特异性抗原等进行鉴定。（3）细胞是否发生转化和恶变：主要通过核型分析、细胞生长行为观察（是否丧失接触抑制）、裸鼠成瘤实验等进行鉴定。（4）细胞有无发生交叉污染，主要通过同工酶及DNA指纹图谱技术进行鉴定。

二、对**细胞系的鉴定

对**细胞系的鉴定主要围绕其恶型性展开，染色体的异常、接触抑制和密度依赖生长特性的改变、集落形成能力、裸鼠成瘤、动物体内的侵袭生长，以及某些基因、分子水平的特征均是**细胞鉴定的方向。

技术应用

一、作为临床诊断工具

定量检测外周血及组织中抗原特异性CTI，的比率，并进行表型及功能分析。Altman等曾在大量无症状AIDS患者体内检测到抗原特异性CTI。，检出率高达2％。Zerbini等应用四聚体技术及*组化方法**在肝细胞肝癌患者**组织中检测到肽特异性的CD8 CTL，为针对MAGE抗原的***在HCC中的应用提供了广阔的前景。在自身*性疾病中四聚体原位染色较早用于TCR转基因小鼠。通过对抗原特异性CTL的定量检测、表型及功能分析，为阐明病毒感染性疾病、**及自身*性疾病的发病机制奠定了基础。

二、用于过继性*****

Mei-denbauer等将大量Melan-A肽特异性CTL(42．1％)，静脉输注给8例难治性恶性黑色素瘤患者，结果发现外周血单核细胞中抗原特异性CTL的比率由输注的o．01％～0．07％升至输注后的2％。而且这些细胞能在活体内存活数周，具有分泌INF-7功能，并**聚集到**局部发挥作用。

三、用于**疗效的监测

近年用抗原肽脉冲处理的扰作为***机体从而诱发有效的CTL反应成为研究热点。可用同源肽构建的四聚体监测该**的疗效。

细胞STR鉴定的意义

由于细胞培养体系在生物药物的研究和技术发展中非常重要，适当的细胞系鉴定过程即成为每个研究人员的较大兴趣点。然而，交叉污染的问题仍然存在。随着世界范围内实验室使用新细胞系的数量增多和频率增加，在质量控制(如：细胞系鉴定)的基本原则上产生了**的差别。从已经发表的、使用"错误"的细胞系而导致可疑性结果的研究论文，到用于临床的干细胞系和其它细胞系，交叉污染影响到了科学研究的每个领域-从实验台到临床。如果在细胞培养的处理和操作中不进行重大变革，那么交叉污染将会成为一个更大、更严重的问题。

细胞培养体系在生物研究和药物研究发展中非常重要，随着研究的深入，细胞系的种类也逐渐增多，而细胞系的交叉污染仍然存在。交叉污染给实验研究带来了很严重的问题，如果使用了错误的细胞系使研究的结果遭到质疑，前期的实验可能都要重新来做。因此对细胞系的认证是有必要的。

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