细菌生长曲线测定

时间：2022-01-07

细菌生长曲线测定

细菌生长曲线(Bacterial growth curve)是专指单细胞微生物的。它是将少量的单细胞微生物接种纯种到一定容积的液体培养基后，在适宜的条件下培养，定时取样测定细胞数量。以细胞增长数目的对数做纵坐标，以培养时间做横坐标，绘制一条如图所示的曲线，我们称这条曲线为细菌的生长曲线。

测定步骤

(1)菌液培养：在菌株的斜面培养物上挑取一环菌苔，接种千肉汤培养基中， 3TC静止培养12h 左右，此菌液即为种子培养液。

(2)分装培养液及校正零点：用无菌移液管吸取25mL 培养基加至有侧臂试管的三角烧瓶中。将未接种的培养液倾入其侧臂试管中，并在光电比色计上调节零点。即使光电比色计上的OD 值在零点上。

(3)接种及零时测定：用移液吸管吸取2. SmL 种子培养液接种瓶中，并充分摇匀。将刚接种的培养液倾入侧臂试管中，测定光电比色计OD 值。此时的读数为接种后菌种生长曲线中的零时读数值( 即接种拭)。

(4)培养及生长量测定将零时测定后的三角烧瓶立即放人恒温水浴摇床上震荡培养，培养温度为3TC, 摇床的频率为100 次/min 左右(温度和频率可随时调节) 。在培养中，应每隔30min 从摇床上取下三角烧瓶，将菌液倾入侧臂试管中，并在光电比色计上读取OD 值。记录每次所测得的数据。在每次测定时，均要用空白对照管的培养液来校正光电比色计的零点。

(5)绘制生长曲线：以测定的时间为横坐标，菌数的对数(OD 值)为纵坐标，在半对数坐标纸上描点绘图，所得的曲线即为被测荫在实验条件下的生长曲线。

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